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領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新

—— 中國食品雜志社

2024年第45卷13期返回列表

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河蝦過敏原原肌球蛋白的基因克隆與原核表達(dá)

內(nèi)容: 為了探尋天然原肌球蛋白的可替代物作為診斷和治療蝦類過敏的基礎(chǔ)材料，本研究從河蝦中提取總RNA，利用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)克隆河蝦過敏原原肌球蛋白基因的全長序列。以此序列設(shè)計表達(dá)引物，構(gòu)建表達(dá)載體，最后通過異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside，IPTG）誘導(dǎo)表達(dá)重組原肌球蛋白。結(jié)果顯示，河蝦的原肌球蛋白基因cDNA序列全長1 658 bp，開放閱讀框855 bp，編碼284 個氨基酸，預(yù)測蛋白等電點(diǎn)4.70，預(yù)測分子質(zhì)量32.8 kDa。河蝦原肌球蛋白cDNA序列已上傳至GenBank數(shù)據(jù)庫，登錄號為OP974621。本研究成功構(gòu)建河蝦原肌球蛋白重組表達(dá)質(zhì)粒pET-30a-TM，并用IPTG進(jìn)行體外誘導(dǎo)表達(dá)，最佳誘導(dǎo)條件為IPTG濃度1 mmol/L、37 ℃誘導(dǎo)4 h。可溶性分析結(jié)果表明重組原肌球蛋白主要以可溶性形式存在于細(xì)胞破碎液的上清液中，分子質(zhì)量約38 kDa。

閱讀量: 126 發(fā)表時間: 2024-08-04
副溶血性弧菌luxS缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性

內(nèi)容: 本實(shí)驗(yàn)通過同源重組技術(shù)構(gòu)建副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）luxS突變株，比較野生株和突變株的生長能力、4,5-二羥基-2,3-戊二酮（4,5-dihydroxy-2,3-pentanedione，DPD）含量、生物被膜形成能力、運(yùn)動能力、藥物敏感性、胞外蛋白分泌能力以及群體感應(yīng)相關(guān)基因的表達(dá)量，研究LuxS/AI-2群體感應(yīng)系統(tǒng)LuxS基因缺失后對副溶血性弧菌生物學(xué)特性的影響。結(jié)果顯示，敲除luxS基因并不影響菌株的藥物敏感性和生長能力；與野生株相比，突變株的DPD含量、泳動能力顯著降低，而生物被膜形成能力、培養(yǎng)24 h的胞外蛋白酶分泌能力顯著增強(qiáng)；實(shí)時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)果顯示突變株的鞭毛合成基因flgM的表達(dá)量顯著上升，而溶血素分泌相關(guān)基因toxS、鞭毛合成基因flaA、外膜蛋白基因ompW的表達(dá)量均顯著下降。本實(shí)驗(yàn)可為進(jìn)一步研究副溶血性弧菌LuxS/AI-2群體感應(yīng)系統(tǒng)對其生物學(xué)特性的調(diào)控機(jī)制提供參考，有助于預(yù)防和控制副溶血性弧菌。

閱讀量: 101 發(fā)表時間: 2024-08-04
不同香型大曲微生態(tài)結(jié)構(gòu)及其發(fā)酵特性相關(guān)性分析

內(nèi)容: 以清香型、濃香型和醬香型白酒大曲為研究對象，采用理化分析、頂空固相微萃取氣相色譜-質(zhì)譜檢測和高通量測序技術(shù)，探究不同香型大曲微生態(tài)與理化指標(biāo)和酒質(zhì)特征風(fēng)味化合物的潛在關(guān)系。結(jié)果表明，清香大曲的糖化力和發(fā)酵力最高，濃香型大曲的酯化力和淀粉含量最高，醬香型大曲的酸度最高。3 種香型大曲優(yōu)勢細(xì)菌屬包括乳酸桿菌屬（Saccharopolyspora）、魏斯氏菌屬（Weissella）、芽孢桿菌屬（Bacillus）；優(yōu)勢真菌屬包括復(fù)膜孢酵母屬（Saccharomycopsis）、曲霉屬（Aspergillus）、嗜熱霉菌屬（Thermomyces）。相關(guān)性分析表明，芽孢桿菌屬與糖化力、液化力、發(fā)酵力、癸酸乙酯、苯乙醇呈正相關(guān)；嗜熱霉菌屬與己酸乙酯、異戊醇、乳酸乙酯、乙酸、川芎嗪呈正相關(guān)。

閱讀量: 87 發(fā)表時間: 2024-08-04
紅鰭東方鲀魚皮膠原蛋白制備抗酪氨酸酶活性肽及其活性表征

內(nèi)容: 為有效利用紅鰭東方鲀魚皮制備膠原蛋白活性肽，本研究采用響應(yīng)面法優(yōu)化水解條件，制備紅鰭東方鲀魚皮酸溶性膠原蛋白的抗酪氨酸酶活性肽，通過評價經(jīng)超濾分級后不同分子質(zhì)量肽的抗酪氨酸酶活性、抗氧化活性、模擬消化后活性動態(tài)變化及吸濕、保濕性能差異，探究其應(yīng)用潛力。結(jié)果表明，利用中性蛋白酶進(jìn)行酶解，最佳工藝條件為底物質(zhì)量濃度2.9 g/100 mL、酶解時間7.8 h、酶添加量7 862 U/g。在此條件下，酪氨酸酶活性抑制率為（35.14±0.03）%。酶解產(chǎn)物分子質(zhì)量主要分布于0～5 kDa。抗酪氨酸酶活性較高組分為CP-1（＜3 kDa），其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)陽離子自由基和羥自由基清除率的半抑制濃度分別為9.51、2.03 mg/mL和7.29 mg/mL。經(jīng)體外模擬消化后CP-1仍具有較高的抗酪氨酸酶活性和抗氧化活性。此外，CP-1具有較高的吸濕、保濕性能，可代替甘油。本研究可為紅鰭東方鲀魚皮膠原蛋白肽的精深加工與應(yīng)用提供理論依據(jù)。

閱讀量: 103 發(fā)表時間: 2024-08-04
異常威克漢姆酵母和釀酒酵母復(fù)合發(fā)酵對饅頭品質(zhì)的改善

內(nèi)容: 本研究從酸面團(tuán)中分離釀酒酵母和非釀酒酵母菌，在78 株釀酒酵母中篩選出1 株產(chǎn)氣能力強(qiáng)于商業(yè)活性干酵母的菌株，命名為釀酒酵母SQJ20。為提高饅頭風(fēng)味等品質(zhì)，選擇異常威克漢姆酵母GZJ2和德爾布有孢圓酵母SDJ6進(jìn)行復(fù)合發(fā)酵饅頭制作。當(dāng)釀酒酵母SQJ20與異常威克漢姆酵母GZJ2以1∶2的比例共發(fā)酵時可顯著提高饅頭的品質(zhì)。此外，異常威克漢姆酵母GZJ2的添加提高了總蛋白質(zhì)和游離氨基酸含量（13.69%），其中以甜味脯氨酸（94.69%）、芳香型苯丙氨酸（82.63%）和必需賴氨酸（66.26%）提高的幅度最大。電子鼻和感官評價結(jié)果也證實(shí)，添加異常威克漢姆酵母GZJ2能有效改善饅頭的品質(zhì)。綜上，在不延長發(fā)酵時間的情況下，用釀酒酵母SQJ20和異常威克漢姆酵母GZJ2復(fù)合發(fā)酵能夠提高饅頭品質(zhì)，本研究結(jié)果可為風(fēng)味饅頭的工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。

閱讀量: 101 發(fā)表時間: 2024-08-04
植物乳桿菌體外發(fā)酵藜麥水不溶性膳食纖維對腸道菌群及產(chǎn)短鏈脂肪酸的影響

內(nèi)容: 為探究體外發(fā)酵藜麥水不溶性膳食纖維和外源添加乳酸菌對腸道菌群及短鏈脂肪酸（short-chain fatty acids，SCFAs）的影響，本研究采用糞便濾液和植物乳桿菌對藜麥水不溶性膳食纖維進(jìn)行體外發(fā)酵，通過氣相色譜測定產(chǎn)生的SCFAs含量，并通過16S rDNA測序分析菌群結(jié)構(gòu)和豐度的變化。結(jié)果表明，藜麥水不溶性膳食纖維和植物乳桿菌的添加能夠改變腸道菌群的結(jié)構(gòu)和豐度。在門水平上，添加藜麥水不溶性膳食纖維和植物乳桿菌發(fā)酵12 h后都能夠增加擬桿菌門的豐度；在屬水平上，藜麥水不溶性膳食纖維增加了有益菌（普雷沃氏菌屬）的豐度。與糞便濾液體外發(fā)酵藜麥水不溶性膳食纖維相比，外源添加植物乳桿菌組顯著增加了SCFAs的產(chǎn)量。綜上所述，植物乳桿菌體外發(fā)酵藜麥水不溶性膳食纖維能顯著改變腸道菌群的豐富度和多樣性，并且能夠促進(jìn)SCFAs的產(chǎn)生，有利于腸道健康。

閱讀量: 108 發(fā)表時間: 2024-08-04
4 株雙歧桿菌對秀麗隱桿線蟲的體內(nèi)抗衰老作用

內(nèi)容: 為探究4 株雙歧桿菌（假小鏈雙歧桿菌BP-1、長雙歧桿菌BL-3、動物雙歧桿菌BA-5、嬰兒雙歧桿菌BI-38）對秀麗隱桿線蟲的體內(nèi)抗衰老作用，測定4 株雙歧桿菌對線蟲壽命、生殖能力、活力、體形、抗逆性、體內(nèi)脂褐素水平、抗氧化酶活力和丙二醛含量的影響。結(jié)果表明，與空白對照組（大腸桿菌OP50）相比，BA-5、BI-38有效地延長了線蟲的壽命（P＜0.05），BP-1、BL-3對線蟲壽命影響不顯著（P＞0.05）；同時BA-5、BI-38并不會減少線蟲的產(chǎn)卵量和削弱線蟲的運(yùn)動能力（P＞0.05），且能有效增強(qiáng)其吞咽能力并顯著減小體形（P＜0.05）；BA-5、BI-38能夠有效增強(qiáng)線蟲的抗熱應(yīng)激和抗氧化應(yīng)激能力進(jìn)而延長其壽命（P＜0.05），顯著減少體內(nèi)脂褐素積累和降低丙二醛含量（P＜0.05），并顯著提高線蟲體內(nèi)的2 種抗氧化酶（過氧化氫酶、超氧化物歧化酶）的活力（P＜0.05）。綜上，嬰兒雙歧桿菌BI-38和動物雙歧桿菌BA-5具有更強(qiáng)的體內(nèi)抗衰老活性。

閱讀量: 109 發(fā)表時間: 2024-08-04
富二十二碳六烯酸-磷脂酰絲氨酸緩解環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的小鼠腎損傷機(jī)制

內(nèi)容: 目的：研究富二十二碳六烯酸-磷脂酰絲氨酸（docosahexaenoic acid-enriched phosphatidylserine，DHA-PS）對環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）誘導(dǎo)小鼠腎損傷的改善作用及其機(jī)制。方法：32 只雄性ICR小鼠隨機(jī)分為正常組（CON組）、模型組（MOD組）、50 mg/kg mb DHA-PS組（50 DHA-PS組）和100 mg/kg mb DHA-PS組（100 DHA-PS組），每組8 只。腹腔注射80 mg/kg mb CTX建立小鼠腎損傷模型，5 d后，MOD組和DHA-PS組分別灌胃等量生理鹽水或DHA-PS，7 d后處死小鼠。測定各組小鼠腎臟指數(shù)、血清生化指標(biāo)、腎臟氧化應(yīng)激和炎癥因子表達(dá)水平，分析組織病理變化及腎臟組織非靶向代謝組學(xué)。結(jié)果：與MOD組相比，DHA-PS可顯著降低小鼠腎臟指數(shù)以及肌酐、尿素氮、胱抑素C和腎損傷分子-1水平（P＜0.05）；顯著提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和過氧化氫酶等抗氧化酶活性（P＜0.05），并顯著降低丙二醛含量（P＜0.05）；顯著下調(diào)白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6、IL-1β、腫瘤壞死因子-α等促炎細(xì)胞因子的表達(dá)（P＜0.05），顯著上調(diào)抗炎細(xì)胞因子IL-10的含量（P＜0.05）。染色結(jié)果顯示，DHA-PS組小鼠腎臟組織結(jié)構(gòu)明顯恢復(fù)。此外，腎臟組織代謝組學(xué)分析結(jié)果表明，DHA-PS主要通過影響甘油磷脂代謝、嘌呤代謝及其代謝物緩解CTX導(dǎo)致的小鼠腎臟代謝紊亂。結(jié)論：DHA-PS可通過減輕氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)甘油磷脂代謝和嘌呤代謝等途徑緩解CTX導(dǎo)致的小鼠腎損傷。

閱讀量: 94 發(fā)表時間: 2024-08-04
不同品種葡萄添加量對果啤香氣、理化指標(biāo)及抗氧化活性的影響

內(nèi)容: 為探究不同葡萄品種在葡萄啤酒釀造中的應(yīng)用價值及其對啤酒品質(zhì)的影響，開展不同品種葡萄添加量對果啤香氣、理化指標(biāo)及抗氧化活性影響的研究。分別在啤酒發(fā)酵過程中添加體積分?jǐn)?shù)30%、40%的西拉葡萄醪和美樂葡萄醪，對比不同添加量葡萄醪對香氣、理化指標(biāo)和抗氧化活性的影響，同時結(jié)合感官品評確定品質(zhì)更優(yōu)的葡萄啤酒。結(jié)果表明，西拉和美樂均提高了啤酒中的酚類物質(zhì)含量、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力、鐵離子還原力以及銅離子還原能力，同時顯著提高了啤酒的酸度和乙醇體積分?jǐn)?shù)；香氣物質(zhì)分析結(jié)果表明，添加體積分?jǐn)?shù)30%西拉和40%美樂葡萄醪組的香氣含量最高，與對照相比分別增加了190.55%和152.65%；感官品評分析表明，添加體積分?jǐn)?shù)30%西拉葡萄醪組釀造的啤酒口感最好。總體來看，不同品種的葡萄醪添加對提高啤酒品質(zhì)及香氣有積極作用，可成為未來多元化啤酒產(chǎn)品開發(fā)的重要方向。

閱讀量: 112 發(fā)表時間: 2024-08-04
濃香型基酒中糊味特征物質(zhì)解析

內(nèi)容: 為探究濃香型白酒基礎(chǔ)酒糊味特征物質(zhì)，采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對濃香型白酒正常基酒和帶有糊味基酒的風(fēng)味成分進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，兩類基酒檢測出139 種風(fēng)味物質(zhì)，其中20 種差異性物質(zhì)可用于區(qū)分兩類酒體，聚類熱圖分析結(jié)果表明2,4-二叔丁基苯酚、月桂酸乙酯、己酸丁酯、辛酸己酯、庚酸庚酯、己酸戊酯、己酸己酯、己酸和辛酸9 種風(fēng)味物質(zhì)在糊味基酒中含量較為突出。感官重組、缺失、添加實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明濃香型白酒中糊味的表征并不是由單一化合物引起，而是多個化合物的相互作用。本研究發(fā)現(xiàn)2,4-二叔丁基苯酚和酯類物質(zhì)與濃香型基酒中糊味的表征有重要聯(lián)系。

閱讀量: 103 發(fā)表時間: 2024-08-04

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