不同類型基質(zhì)對基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析寡糖和多糖的影響
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本實(shí)驗(yàn)研究二元基質(zhì)（氨基-4-羥基苯甲酸（amino-4-hydroxybenzoic acid，AHB）/2,5-二羥基苯甲酸（2,5-dihydroxybenzoic acid，DHB）、3-羥基香豆素（3-hydroxycoumarin，3-HC）/DHB）、離子液體基質(zhì)（N,N-二甲基苯胺/DHB、2-(對羥基苯偶氮)苯甲酸/1,1,3,3-四甲基胍（1,1,3,3-tetramethylguanidine，TMG）、4-羥基香豆酸/TMG、2,4,6-三羥基苯乙酮（2,4,6-trihydroxyacetophenone，THAP）/TMG、N-甲基苯胺（N-methylaniline，NMA）/DHB）和反應(yīng)性基質(zhì)（3-肼基苯甲酸（3-hydrazylbenzoic acid，3-HBA）/DHB、6-肼煙酸（6-hydrazine niacin，HYNIC）/DHB、2-肼吡啶（2-hydrazopyridine，2-HPM））對基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）檢測麥芽八糖、半乳糖醛酸三糖和Dextran T6效果的影響，并與3 種固體基質(zhì)對比（DHB、THAP、α-氰基-4-羥基肉桂酸）。以麥芽八糖為例，研究各基質(zhì)溶劑對檢測寡糖效果的影響，針對反應(yīng)性基質(zhì)還研究了溶劑、反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度對衍生化率的影響。結(jié)果表明，對于麥芽八糖，3 類基質(zhì)均具有較理想的檢測效果，譜圖重現(xiàn)性好、質(zhì)譜峰強(qiáng)度增加。對于反應(yīng)性基質(zhì)，其衍生化的反應(yīng)溫度至少為65 ℃，其中2-HPM在各條件下均具有高衍生效率（（96.28±0.28）%），且能在較短時(shí)間（15 min）內(nèi)完成衍生化反應(yīng)，但是衍生化寡糖的信噪比（RSN）不高，而3-HBA/DHB和HYNIC/DHB衍生化寡糖的RSN高，但是衍生化效率較低，且反應(yīng)時(shí)間至少需要60 min。此外，寡糖濃度對衍生化效率影響顯著，當(dāng)濃度低于108 fmol/L，衍生化寡糖信號很低或未被檢測到。當(dāng)THAP及3-HBA/DHB為基質(zhì)時(shí)，其半乳糖醛酸三糖的質(zhì)譜信號顯著高于其余基質(zhì)類型；對于Dextran T6，二元基質(zhì)和離子液體基質(zhì)的檢測效果較優(yōu)，其中AHB/DHB、3-HC/DHB、THAP/TMG、NMA/DHB為基質(zhì)具有更廣的分子質(zhì)量測定范圍，最高均可檢測聚合度為36的多糖質(zhì)譜峰。本實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)研究不同類型基質(zhì)對MALDI-TOF-MS檢測3 種不同類型碳水化合物效果的影響，研究結(jié)果可為碳水化合物的分析鑒定提供參考依據(jù)。
閱讀量: 27 發(fā)表時(shí)間: 2025-06-23
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