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—— 中國食品雜志社

2013年第34卷09期返回列表

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右旋糖苷對生姜蛋白酶的化學修飾及其酶學性質影響

內容: 以NaIO4活化的右旋糖苷為修飾劑，研究修飾反應條件對生姜蛋白酶化學修飾效果的影響與修飾前后酶學性質及構型構象的變化。結果表明：較佳修飾條件為溫度42℃、pH 6.0、酶與活化右旋糖苷質量比1:22、修飾時間3h。與修飾前天然生姜蛋白酶相比，修飾酶的相對酶活力提高了2.0倍，酶蛋白氨基修飾率為57.8%。以酪蛋白為底物時，修飾酶的最適溫度、最適pH值和酶反應動力學參數(shù)Km值較天然生姜蛋白酶均有所降低，熱穩(wěn)定性明顯增強；修飾酶的紫外光譜吸收峰向長波長方向偏移，構型構象發(fā)生了變化。

閱讀量: 131 發(fā)表時間: 2017-06-07
Ⅵ型類人膠原蛋白基因COL6A2的克隆及在畢赤酵母中的分泌表達

內容: 用PCR方法以Ⅵ型膠原蛋白基因組DNA為模板，獲得Ⅵ型膠原蛋白α2鏈基因，并將該基因插入到表達載體pPIC9K，對重組質粒pPIC9K-COL6A2所含的目的片段進行雙向測序。將測序正確的重組質粒用限制性內切酶SalⅠ線性化，經(jīng)電擊轉化到畢赤酵母GS115感受態(tài)細胞中。通過MM/MD法進行甲醇利用表型的篩選，PCR鑒定目的基因的整合及G418梯度篩選高拷貝轉化菌。在酵母α-Factor及AOX1基因啟動子和終止信號的調控下，目的蛋白分泌表達到胞外。1%甲醇誘導72h的發(fā)酵液，經(jīng)SDS-PAGE電泳鑒定該重

閱讀量: 128 發(fā)表時間: 2017-06-07
黑曲霉H1-9b發(fā)酵產葡萄糖氧化酶的工藝優(yōu)化

內容: 以黑曲霉H1-9b(Aspergillus niger H1-9b)作為葡萄糖氧化酶生產菌株，通過單因素和正交試驗設計，優(yōu)化提高酶活力的發(fā)酵條件。結果表明：最佳反應條件為：接種量200μL孢子懸液、裝液量80mL、初始pH5.3、轉速200r/min、表面活性劑吐溫-80添加量3%。在此條件下，葡萄糖氧化酶活力提高到68.96U/mL，為不添加吐溫-80發(fā)酵產酶量28.60U/mL的2.4倍。

閱讀量: 133 發(fā)表時間: 2017-06-07
黑曲霉ZJUQH產α-半乳糖苷酶的固體發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化研究

內容: 通過響應面方法優(yōu)化固體發(fā)酵培養(yǎng)基，以提高黑曲霉ZJUQH產α-半乳糖苷酶的能力。在前期研究的基礎上，通過部分因子試驗對蛋白胨、Na2HPO4·12H2O、料液比和接種量進行系統(tǒng)考察，篩選出兩個影響較顯著的因素料液比和蛋白胨添加量，然后通過中心組合試驗進一步優(yōu)化，建立以α-半乳糖苷酶酶活力為響應值的二次回歸方程模型，獲得了最優(yōu)的固體發(fā)酵培養(yǎng)基組成：蛋白胨0.6g、Na2HPO4·12H2O 0.08g、料液比1:2.44(m/V)接種量1.5mL/5g。在該優(yōu)化的培養(yǎng)條件下，固態(tài)發(fā)酵6d產α-半乳糖苷酶的酶

閱讀量: 123 發(fā)表時間: 2017-06-07
脂肪酶在尼龍網(wǎng)上的固定化及其酶學性質研究

內容: 以尼龍網(wǎng)為載體，戊二醛為交聯(lián)劑制備固定化脂肪酶(Candida sp. 99-125)，并對固定化條件及固定化酶的酶學性質進行研究。結果表明，最適固定化條件為：戊二醛體積分數(shù)3%、交聯(lián)時間60min、脂肪酶質量濃度10mg/mL、固定化時間6h。與游離酶相比，固定化脂肪酶的最適溫度從45℃提高至50℃，最適pH值相同，均為7.0，并在pH5.0～7.0范圍內均有非常高的活力。固定化脂肪酶相對于游離酶具有更好的熱穩(wěn)定性和pH值穩(wěn)定性，并具有良好的操作穩(wěn)定性，其重復操作5次后相對酶活力仍保持在80%左右。固定

閱讀量: 135 發(fā)表時間: 2017-06-07
火雞肌肉丙氨酰氨肽酶的酶學特性

內容: 通過45%～65%的硫酸銨沉淀法，從火雞肌肉中分離得到初步純化的丙氨酰氨肽酶(AAP，EC 3.4.11.14)，研究其酶學特性及鹽分和AAP水解產物對其酶活力的影響。結果表明：AAP的最適反應溫度為37～39℃，最適pH值約為6.8～7.5。0.8mol/L的NaCl僅抑制10%的AAP相對酶活力，說明鹽分對AAP的酶活力抑制作用較弱；AAP主要水解產物丙氨酸(Ala)對AAP幾乎沒有抑制作用，而其他產物氨基酸均對AAP有較顯著的反饋抑制作用(P＜0.05)，對AAP的抑制作用強弱順序為苯丙氨酸＞賴氨酸

閱讀量: 143 發(fā)表時間: 2017-06-07
牦牛奶酪中乳酸菌的分離鑒定及發(fā)酵性能分析

內容: 為了探討牦牛奶酪中乳酸菌菌種的多樣性和發(fā)酵性能，從西藏、云南、新疆采集了17個樣品，用MRS培養(yǎng)基菌落計數(shù)平均值為(4.08±0.60)(lg(CFU/g))，pH值平均值為4.52±0.29，采用表型和基因型相結合的方法鑒定出39株乳酸菌，其中乳桿菌35株為L. buchneri 2株、L. casei 16株、L. diolivorans 3株、L. fermentum 3株、L.helveticus 3株、L. kefiri 3株和L. plantarum 5株，片球菌4株為P. acidilact

閱讀量: 131 發(fā)表時間: 2017-06-07
茶樹EGCG-O-甲基轉移酶的純化及酶學性質

內容: 對重組茶樹EGCG-O-甲基轉移酶進行分離純化，并對其酶學性質進行研究。結果表明：經(jīng)HisTMTrap層析純化后，獲得了純度超過95%的重組融合蛋白，純化倍數(shù)為22.51倍，酶活回收率為34.54%，酶比活力達到0.0186U/mg；酶分子質量約為27.6kD；該酶的最適反應溫度為35℃、最適pH7.5；以表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)作為底物，酶學動力學常數(shù)Km為0.100mmol/L，Vmax為7.485mg/(L.min)。

閱讀量: 121 發(fā)表時間: 2017-06-07
榛子仁蛋白酶解工藝的優(yōu)化及酶解物抗氧化能力的研究

內容: 以東北毛榛子為原料，通過響應面法對Alcalase堿性蛋白酶水解榛子仁蛋白的條件進行優(yōu)化并建立回歸模型，得到最佳水解條件為：酶與底物比3720U/g、酶解溫度50.6℃、酶解pH 8.4，此工藝條件下的水解度預測值為14.41%，水解度實測值為(14.38±0.06)%。抗氧化能力測定結果表明：榛子仁蛋白酶解物的總還原能力約為VC的70%，清除DPPH自由基的半數(shù)抑制質量濃度(IC50)值為0.7311mg/mL，是VC值的138倍。

閱讀量: 127 發(fā)表時間: 2017-06-07
雞骨渣中蛋白質的酶解應用效果研究

內容: 以雞骨渣為原料，研究木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶和復合蛋白酶對酶解后的殘渣量、酶解濃縮液的氨基酸組成和以酶解濃縮液為基料制備出的雞肉香精效果，確定適用于開發(fā)雞骨渣產品的蛋白酶類。結果表明：4種蛋白酶在最佳酶解條件下中試酶解后產品的殘渣量分別為26.37%、32.47%、43.25%和30.36%，與小試基本一致，以木瓜蛋白酶酶解液中最低。4種酶解液中氨基酸總量(TAA)和必需氨基酸(EAA)含量差異顯著(P＜0.05)，其中以木瓜蛋白酶酶解液中含量最高，分別為6.505mg/g和14.965mg/g

閱讀量: 126 發(fā)表時間: 2017-06-07

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