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羊骨骼肌肌鈣蛋白T單克隆抗體的制備及其特性
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 234 發(fā)表時(shí)間: 2020-02-29
作者: 劉靜靜,王振華,李素紅,張 靜,吳 萌,杜順豐,張 巖,李春生
關(guān)鍵詞: 羊骨骼肌肌鈣蛋白T;單克隆抗體;肉類來源;免疫鑒別;特異性
摘要:

制備抗羊骨骼肌肌鈣蛋白T(skeletal muscle troponin T,sTnT)的單克隆抗體,評(píng)價(jià)單抗的特性。通過煮 沸提取、切膠純化制備sTnT,融合后獲得分泌抗羊sTnT的雜交瘤細(xì)胞株,用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)單抗效價(jià)、 亞型、特異性等。結(jié)果表明:篩選后獲得3 株單克隆抗體(2E11、3D3、4C2),其中4C2特異性好,效價(jià)達(dá)到 15.12×105以上,為IgG1亞型,親和常數(shù)(Ka)為1.1×109 L/mol;免疫印跡結(jié)果顯示,該單抗能與牛、羊的骨骼 肌提取物反應(yīng),與雞、鴨的骨骼肌提取物無明顯反應(yīng),表明4C2可以用于區(qū)分反芻動(dòng)物和禽類的骨骼肌組織。

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