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不同細胞破碎方法對肉牛、牦牛背最長肌雙向電泳圖譜的影響
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 255 發(fā)表時間: 2017-11-27
作者: 左惠心;韓玲;牛克蘭;王琳琳;張佳瑩;余群力
關鍵詞: 細胞破碎;肉牛;牦牛;背最長肌;蛋白質(zhì)提取;雙向電泳
摘要:

采用液氮研磨、液氮研磨輔助超聲波破碎和液氮研磨輔助玻璃珠破碎3種細胞破碎方法對肉牛、牦牛背最長肌蛋白質(zhì)提取和雙向電泳圖譜效果的最佳方法進行研究。在相同裂解液組成、等電聚焦程序、十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰氨凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)操作、銀染法染色等雙向電泳條件的處理下,通過Bradford法分別測定不同方法提取的肉牛和牦牛肉背最長肌中蛋白質(zhì)的含量,并采用PDQuest 8.0.1軟件對雙向電泳圖譜的效果進行分析。結(jié)果表明:3種細胞破碎方法提取的肉牛和牦牛背最長肌蛋白質(zhì)含量差異顯著,其中液氮研磨輔助超聲波破碎法((2.59±0.15)、(2.84±0.29)μg/μL)顯著高于其他2種方法,液氮研磨輔助玻璃珠破碎法((2.01±0.04)、(2.21±0.02)μg/μL)顯著高于液氮研磨法((1.77±0.11)、(1.95±0.19)μg/μL)。3種方法所得肉牛背最長肌雙向電泳圖譜的蛋白點個數(shù)分別為(279±19)、(581±15)、(363±21)個;所得牦牛肉雙向電泳圖譜的蛋白點個數(shù)分別為(292±15)、(596±12)、(385±17)個。3種方法中液氮研磨輔助超聲波破碎法提取的肉牛、牦牛背最長肌蛋白質(zhì)含量最高,數(shù)量最多,蛋白點分離程度最好,并且3種細胞破碎方法在牦牛背最長肌中提取的蛋白質(zhì)含量與肉牛背最長肌中提取的蛋白質(zhì)含量差異不顯著。

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