領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
以rpoA基因?yàn)榘谢颍⒕G色魏斯氏菌SYBR Green Ⅰ實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）快速檢測(cè)方法。針對(duì)rpoA基因設(shè)計(jì)特異性引物，建立綠色魏斯氏菌實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)體系，通過(guò)特異性、靈敏度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)體系的檢測(cè)效果，同時(shí)與常規(guī)PCR方法進(jìn)行比較。結(jié)果表明：實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法能夠特異性檢出綠色魏斯氏菌，對(duì)基因組DNA的檢測(cè)靈敏度達(dá)到2.667×10－3 pg/μL，對(duì)純培養(yǎng)物和模擬污染牛肉樣品直接檢測(cè)的靈敏度分別為30 CFU/mL和0.8 CFU/g；與常規(guī)PCR相比，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)的靈敏度是其1 000 倍；不同濃度樣品獨(dú)立重復(fù)實(shí)驗(yàn)循環(huán)閾值的標(biāo)準(zhǔn)差均小于1，變異系數(shù)在0.02%～1.28%之間。本研究所建立的綠色魏斯氏菌實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法具有特異性好、靈敏度高、重復(fù)性好的特點(diǎn)，能夠進(jìn)行準(zhǔn)確的定量檢測(cè)，是快速檢測(cè)綠色魏斯氏菌的有效手段。
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