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呋喃西林代謝物單克隆抗體的制備及免疫學(xué)特性鑒定
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 273 發(fā)表時間: 2020-04-27
作者: 徐冬梅,李亞英,耿海波,李玉靜
關(guān)鍵詞: 呋喃西林代謝物;氨基脲;細胞融合;單克隆抗體;免疫學(xué)特性
摘要:

為建立呋喃西林代謝物氨基脲(semicarbazide,SEM)的免疫學(xué)檢測方法,采用碳化二亞胺法成功合成人工免疫抗原SEM-牛血清白蛋白(bovine serum albumen,BSA)(SEM-BSA),并用該抗原免疫BALB/c小鼠,采用聚乙二醇介導(dǎo)的細胞融合技術(shù)制備SEM的單克隆抗體(SEM mAb),采用辛酸-硫酸銨沉淀法純化單抗,并對其效價、敏感性、特異性和親和力等免疫學(xué)特性進行鑒定。結(jié)果表明:成功制備SEM單克隆抗體SEM-3D9,抗體效價達到1∶5×106,敏感性半抑制質(zhì)量濃度為0.42 μg/L,亞型為IgG1,親和常數(shù)Ka=2.1×108 L/mol,與呋喃唑酮代謝物2-NP-3-氨基-2-惡唑酮、呋喃它酮代謝物2-NP-5-甲基嗎啉-3-氨基-2-唑烷基酮類似物的交叉反應(yīng)率(cross reaction,CR)均小于0.01%,與呋喃妥因代謝物2-NP-1-氨基-2-乙內(nèi)酰的CR為0.016 8%,特異性良好。

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