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領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新

—— 中國食品雜志社

2021年第42卷17期返回列表

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秦川牛宰后成熟過程中線粒體翻譯延長因子Tu與能量代謝的關(guān)聯(lián)性分析

內(nèi)容: 目的：線粒體翻譯延長因子Tu（mitochondrial Tu translation elongation factor，TUFM）已被證明參與秦川牛宰后成熟過程中的細胞自噬活動，實驗探究該過程中TUFM表達與能量代謝變化的關(guān)系。方法：以秦川牛背最長肌為研究對象，測定4 ℃不同成熟時間（0、2、12、24、48、96、144、192 h）TUFM表達量及含量、葡萄糖（glucose，GLU）、乳酸（lactic acid，LA）、腺苷三磷酸（adenosine triphosphate，ATP）、二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）、單磷酸腺苷（adenosine monophosphate，AMP）6 種物質(zhì)含量以及乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）、琥珀酸脫氫酶（succinate dehydrogenase，SDH）、磷酸丙糖異構(gòu)酶（triose phosphate isomerase，TPI）、蘋果酸脫氫酶（malate dehydrogenase，MDH）、細胞色素c氧化酶（cytochrome c oxidase，COX）5 種酶活性的變化情況。結(jié)果：在秦川牛宰后成熟期間，GLU、ATP、ADP、AMP含量和LDH、SDH、TPI活性均呈下降趨勢，TUFM表達量、MDH活性及LA和TUFM含量均呈先上升后下降趨勢，COX活性呈先下降后上升再下降趨勢。能量代謝各指標和TUFM蛋白主要在宰后初期發(fā)揮作用，對宰后初期及宰后中后期分別進行Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果表明，在宰后初期牛背最長肌中TUFM表達量與MDH、LA呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與ATP、ADP、AMP、LDH、SDH、TPI、COX、GLU呈極顯著負相關(guān)（P＜0.01）。在宰后中后期，TUFM表達與所有指標（GLU、LA、ATP、ADP、AMP、LDH、MDH、SDH、TPI、COX）均呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）。結(jié)論：在宰后初期TUFM表達量逐漸增加，可為肌肉細胞提供能量從而用于能量代謝途徑，該過程可能是TUFM正向參與細胞自噬所致。在宰后中后期能量短缺時，TUFM可能抑制細胞自噬，優(yōu)先將能量用于除細胞自噬外的其他重要途徑（如能量代謝途徑）以維持細胞穩(wěn)態(tài)。綜上，在宰后成熟過程中TUFM具有雙重作用，可調(diào)節(jié)細胞自噬為能量代途徑提供能量，有助于維持宰后能量代謝持續(xù)的時間。

閱讀量: 167 發(fā)表時間: 2024-09-09
紅毛藻多糖抑制大腸桿菌黏附Caco-2細胞的機制

內(nèi)容: 基于體外人結(jié)腸腺癌細胞（Caco-2）單層模型，研究紅毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide，BFP）對大腸桿菌（Escherichia coli）黏附Caco-2細胞的影響以及潛在作用機制。采用CFDA-SE熒光標記技術(shù)分析BFP對E. coli黏附Caco-2細胞單層的影響；利用實時聚合酶鏈式反應(yīng)分析BFP對Caco-2細胞表面整合素β1和E. coli黏附素fimH及E. coli黏附Caco-2細胞導(dǎo)致細胞產(chǎn)生的炎癥因子（白細胞介素（interleukin，IL）-1β、IL-8、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α）和細胞緊密連接蛋白（閉鎖小帶蛋白-1（zonula occludens-1，ZO-1）與Occludin）的基因表達情況，最終基于Western Blot分析驗證ZO-1、Occludin蛋白表達。結(jié)果表明，BFP在質(zhì)量濃度為400～800 μg/mL時能夠顯著抑制E. coli黏附Caco-2細胞單層；BFP主要通過下調(diào)Caco-2細胞表面整合素β1和E. coli黏附素基因fimH的表達抑制細菌的黏附。此外，BFP可顯著抑制E. coli及其培養(yǎng)上清液誘導(dǎo)Caco-2細胞產(chǎn)生的炎癥細胞因子基因表達的上調(diào)、緊密連接蛋白（ZO-1與Occludin）及其基因表達的下調(diào)。綜上所述，BFP能夠抑制E. coli對Caco-2細胞單層的黏附，實驗結(jié)果可為其開發(fā)新型的抗菌產(chǎn)品以及BFP的高值利用和精深加工提供參考。

閱讀量: 165 發(fā)表時間: 2024-09-09
基于全身體積描記技術(shù)評估代表性辣感風(fēng)味物質(zhì)的感官刺激強度

內(nèi)容: 研究辣感物質(zhì)氣溶膠吸入條件下辣感刺激對大鼠呼吸狀態(tài)的影響，通過考察多項呼吸功能指標的變化表征辣感刺激的強度。選取代表性辣感物質(zhì)辣椒素和煙堿為研究對象，采用無束縛全身體積描記系統(tǒng)并結(jié)合霧化給藥裝置，實時監(jiān)測大鼠在不同質(zhì)量濃度辣椒素和煙堿溶液霧化吸入下多項呼吸功能指標的變化。結(jié)果顯示，辣椒素和煙堿的感官刺激引發(fā)相同的呼吸模式，表現(xiàn)為低質(zhì)量濃度促進呼吸，而高質(zhì)量濃度抑制呼吸。低強度辣感刺激促進呼吸頻率上升、松弛時間縮短和呼氣中期流速增大；高強度辣感刺激降低呼吸頻率，延長松弛時間和降低呼吸中期流速。同時辣感刺激強度的增加還導(dǎo)致氣道狹窄指數(shù)的持續(xù)性增大。濃度效應(yīng)曲線進一步表明辣感刺激強度與呼吸功能指標存在明顯的關(guān)聯(lián)性，可通過監(jiān)控氣道狹窄指數(shù)等的變化客觀表征不同辣感物質(zhì)的感官刺激強度。本研究建立了客觀評估辣感物質(zhì)感官刺激強度新方法，為在實驗動物層面進一步探討辣感風(fēng)味感知的腦區(qū)效應(yīng)機制提供了新的手段和參考。

閱讀量: 146 發(fā)表時間: 2024-09-09
基于二維相關(guān)紅外光譜對pH值影響大豆分離蛋白二級結(jié)構(gòu)含量的快速分析

內(nèi)容: 為滿足不同種類食品對大豆分離蛋白（soybean protein isolate，SPI）不同功能性的需求，本研究利用紅外光譜快速采集70 組不同pH值處理后SPI的數(shù)據(jù)，探討pH值變化對SPI結(jié)構(gòu)含量的影響。使用均值中心化、多元散射校正、標準正態(tài)變量變換和歸一化算法對紅外光譜數(shù)據(jù)進行預(yù)處理，基于二維相關(guān)紅外光譜提取特征波段，再利用偏最小二乘（partial least square，PLS）法和算術(shù)優(yōu)化算法-隨機森林（arithmetic optimization algorithm-random forests，AOA-RF）建立不同pH值條件下SPI結(jié)構(gòu)及含量的預(yù)測模型。結(jié)果表明，經(jīng)均值中心化和多元散射校正結(jié)合處理后，α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無規(guī)卷曲模型的相對標準偏差分別為1.29%、1.60%、1.37%、7.28%，兩者結(jié)合對光譜數(shù)據(jù)的預(yù)處理效果最佳。預(yù)測α-螺旋和β-折疊含量最優(yōu)模型為AOA-RF（特征波段），校正集決定系數(shù)為0.935 0和0.926 6，預(yù)測集決定系數(shù)為0.856 8和0.870 1；預(yù)測β-轉(zhuǎn)角和無規(guī)卷曲含量最優(yōu)模型為PLS（特征波段），校正集決定系數(shù)為0.915 4和0.881 7，預(yù)測集決定系數(shù)為0.891 3和0.784 3。本研究結(jié)果可為工業(yè)生產(chǎn)過程中產(chǎn)品質(zhì)量快速檢測和工藝條件控制提供理論支撐。

閱讀量: 156 發(fā)表時間: 2024-09-09
鮰魚骨膠原蛋白肽-鈣螯合物促進鈣轉(zhuǎn)運和成骨細胞分化作用

內(nèi)容: 以實驗室前期制備的鮰魚骨膠原蛋白肽-鈣螯合物（F3-Ca螯合物）為原料，采用Caco-2細胞模型評價其對鈣轉(zhuǎn)運和吸收的影響，再分析其對hFoB1.19成骨細胞堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性以及分化關(guān)鍵基因和蛋白表達的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)F3-Ca螯合物能使Caco-2細胞的鈣轉(zhuǎn)運量提高到0.31 mg/mL，并促進成骨細胞的礦化。當(dāng)F3-Ca螯合物的質(zhì)量濃度為100 μg/mL時，成骨細胞ALP的活性提高了53.68%。反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)和蛋白質(zhì)免疫印跡分析表明F3-Ca螯合物能提高成骨細胞中骨保護素（osteoprotegerin，OPG）、骨鈣素和Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2的基因和蛋白表達水平，降低核因子受體激活因子-κB配體（receptor activator for nuclear factor-κb ligand，RANKL）的基因和蛋白表達水平，增大OPG/RANKL的比值，從而激活OPG/RANKL/核因子受體激活因子-κB信號通路，促進成骨細胞的增殖、分化和礦化，達到加強鈣吸收和抗骨質(zhì)疏松的作用。本研究可為鮰魚骨的高值化利用和新型鈣補充劑的開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

閱讀量: 181 發(fā)表時間: 2024-09-09
總狀蕨藻盾葉變種寡糖的酶解制備及其免疫調(diào)節(jié)活性的作用機制

內(nèi)容: 將總狀蕨藻盾葉變種多糖經(jīng)乳糖酶酶解、膜過濾、透析和凍干制備獲得總狀蕨藻盾葉變種寡糖（Caulerpa racemosa var. peltate oligosaccharide，CRVO-G），測定CRVO-G的相對分子質(zhì)量與單糖組成，評價CRVO-G的免疫調(diào)節(jié)活性，并對其作用機制展開研究。結(jié)果顯示，CRVO-G主要是由相對分子質(zhì)量分別為617.115、621.081和995.368的2 種四糖和1 種六糖組成的寡糖混合物，主要由半乳糖（51.0%）、甘露糖（21.3%）、葡萄糖（11.5%）、木糖（6.5%）、鼠李糖（2.3%）、葡萄糖醛酸（2.0%）、鹽酸氨基葡萄糖（1.8%）、巖藻糖（0.8%）、鹽酸氨基半乳糖（0.7%）、半乳糖醛酸（0.7%）、甘露糖醛酸（0.7%）和阿拉伯糖（0.6%）組成。此外，CRVO-G具有良好的免疫調(diào)節(jié)活性，能促進一氧化氮（NO）和免疫因子的釋放，如白細胞介素-1β、白細胞介素-6和腫瘤壞死因子-α。代謝組學(xué)和蛋白免疫印跡結(jié)果表明，CRVO-G可以促進巨噬細胞花生四烯酸代謝通路中血栓素A2和15-酮前列腺素F2α的合成，提高環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）和核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）的磷酸化蛋白的表達水平。研究表明，在巨噬細胞RAW264.7細胞中CRVO-G通過NF-κB/iNOS/COX-2途徑發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。

閱讀量: 176 發(fā)表時間: 2024-09-09
基于分子對接及動力學(xué)模擬的紅曲橘霉素合成小分子抑制劑的高通量篩選

內(nèi)容: 通過計算機模擬技術(shù)，對紅曲橘霉素合成關(guān)鍵酶CitE的抑制劑進行高通量篩選。首先，采用Alphafold 2對CitE蛋白進行同源建模，并與相似序列比對以預(yù)測配體結(jié)合區(qū)域；隨后，在Arthor數(shù)據(jù)庫中檢索天然配體和黃酮骨架類似物，構(gòu)建了一個包含20 000 個化合物的配體庫；之后，通過Maestro對CitE蛋白和小分子化合物庫進行分子對接，篩選出潛在的CitE配體；并采用Gromacs動力學(xué)模擬評估結(jié)合穩(wěn)定性，通過MM/PBSA計算結(jié)合自由能，之后對蛋白-配體的結(jié)合模式進行分析，進一步確定了槲皮素、木犀草素、芹菜素、染料木素、5,4’-二羥基黃酮、漆黃素6 個小分子配體具有較強的CitE結(jié)合性能。固態(tài)及液態(tài)發(fā)酵結(jié)果表明，上述化合物具有顯著的橘霉素抑制活性。其中，固態(tài)發(fā)酵（20 mg/28 g干物料）添加上述化合物分別使橘霉素產(chǎn)量降低42.52%、48.81%、32.54%、32.57%、21.02%和13.67%，液態(tài)發(fā)酵添加（0.1 g/L）上述化合物分別使橘霉素產(chǎn)量降低33.77%、15.58%、33.33%、62.34%、58.87%、50.22%。本研究對建立高效、安全的紅曲發(fā)酵體系具有借鑒意義。

閱讀量: 160 發(fā)表時間: 2024-09-09
珍珠蚌肉二肽基肽酶-IV抑制肽的制備與分離

內(nèi)容: 目的：以珍珠蚌肉為原料制備對二肽基肽酶（dipeptidyl peptidase，DPP）-IV具有抑制作用的生物活性肽。方法：利用兩步酶解法并優(yōu)化珍珠蚌肉酶解條件，篩選體外DPP-IV抑制活性較高組分進行超濾膜濃縮，SuperdexTM peptide 10/300 GL凝膠柱層析與反相高效液相色譜（reverse phase-high performance liquid chromatography，RP-HPLC）技術(shù)分離純化出酶解液中的DPP-IV抑制肽，最終通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜鑒定其氨基酸序列。結(jié)果：中性蛋白酶與堿性蛋白酶對珍珠蚌肉均有良好降解效果，經(jīng)3 kDa超濾膜濃縮后，酶解產(chǎn)物的DPP-IV抑制率可達67.4%。通過凝膠過濾柱和RP-HPLC進一步分離純化出6 個活性較高的肽段，序列分別為FNAPAM、FIPNY、IYNPPTPF、LAMPYP、FFVVMP和LAGMP。進一步，以分子對接的方式分析6 個肽段與DPP-IV的相互作用關(guān)系。結(jié)論：本研究利用珍珠蚌肉制備DPP-IV抑制肽，可為以水產(chǎn)加工副產(chǎn)物為原料制備功能性食品提供理論參考。

閱讀量: 138 發(fā)表時間: 2024-09-09
亞油酸誘導(dǎo)植物乳桿菌p-8產(chǎn)生共軛亞油酸的蛋白組和類組蛋白乙酰化分析

內(nèi)容: 研究亞油酸（linoleic acid，LA）誘導(dǎo)下植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）p-8的蛋白組和類組蛋白乙酰化水平差異，探究共軛亞油酸（conjugated linoleic acid，CLA）產(chǎn)生的機制。結(jié)果表明，LA的最佳誘導(dǎo)質(zhì)量濃度為1 mg/mL，在此質(zhì)量濃度條件下，蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，烯酰-酰基載體蛋白還原酶、酰基載體蛋白等脂肪酸合成的關(guān)鍵蛋白因子下調(diào)，脂肪酸合成下調(diào)，乙酰基轉(zhuǎn)移酶水平上調(diào)。Western blot結(jié)合體外添加NaAc實驗表明，乙酰輔酶A含量增加導(dǎo)致類組蛋白乙酰化水平提升。實時聚合酶鏈式反應(yīng)檢測顯示，添加LA和NaAc使CLA相關(guān)酶、轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和sigma因子的mRNA表達升高，CLA含量也提高。相關(guān)性分析得出，乙酰輔酶A與LA水合酶轉(zhuǎn)錄水平和CLA含量之間呈顯著正相關(guān)，揭示乙酰輔酶A和乙酰基轉(zhuǎn)移酶含量上調(diào)導(dǎo)致類組蛋白乙酰化加強而上調(diào)CLA合成。結(jié)果為分子改良或科學(xué)調(diào)控乳酸菌以提高CLA轉(zhuǎn)化率奠定了基礎(chǔ)。

閱讀量: 182 發(fā)表時間: 2024-09-09
雞蛋過敏人群腸道菌群特征及其與血清細胞因子的相關(guān)性

內(nèi)容: 目的：分析雞蛋過敏患者腸道菌群組成特征及其與血清細胞因子之間的關(guān)系。方法：共招募20 名受試者，采用16S rRNA基因測序方法測定并分析腸道菌群豐度及組成，采用酶聯(lián)免疫法測定血清中白細胞介素（interleukin，IL）-4、IL-5等食物過敏相關(guān)細胞因子的水平；比較兩組之間腸道菌群結(jié)構(gòu)與細胞因子水平的差異，并分析兩者之間的相關(guān)性。結(jié)果：與對照組相比，雞蛋過敏組血清IL-4、IL-5等細胞因子水平顯著升高（P＜0.05）。16S rRNA基因測序分析結(jié)果顯示，β-變形菌目（Betaproteobacteriales）、伯克氏菌科（Burkholderiaceae）和真桿菌屬（Eubacterium_hallii_group）等豐度在食物過敏組顯著富集（P＜0.05）。采用Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)食竇魏斯氏菌（Weissella cibaria）、大腸桿菌屬（Escherichia）與血清中細胞因子IL-4、IL-13水平呈負相關(guān)。而Burkholderiaceae和uncultured_Parasutterella豐度與轉(zhuǎn)化生長因子β1和IL-13呈正相關(guān)。結(jié)論：本研究在確定雞蛋過敏患者特異性腸道菌群，以及在探索腸道菌群在預(yù)防或治療雞蛋過敏發(fā)生方面具有一定參考意義。

閱讀量: 144 發(fā)表時間: 2024-09-09

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