
為建立一種基于量子點熒光免疫層析技術(shù)快速檢測4 種硝基呋喃類代謝物的方法,采用N-羥基琥珀酰亞胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide hydrochloride,EDC)法合成4 種硝基呋喃類代謝物的人工抗原,并融合制備對應(yīng)的單克隆抗體,通過EDC-NHS一步法將量子點微球(quantum dot submicrobeads,QBs)分別與3-氨基-2-惡唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)、5-甲基嗎啉-3-氨基-2-唑烷基酮(5-morpholine-methyl-3-amino-2-oxazolidinone,AMOZ)、1-氨基-2-乙內(nèi)酰(1-aminohydantoin,AHD)和氨基脲(semicarbazid,SEM)偶聯(lián),得到相應(yīng)的QBs探針,在此基礎(chǔ)上制備復(fù)合熒光免疫層析試紙條。結(jié)果表明:AOZ、AHD、SEM和AMOZ的檢出限分別為0.4、0.4、0.5、0.5 μg/L;通過加標(biāo)回收實驗對批內(nèi)和批間的重復(fù)性和準(zhǔn)確度進(jìn)行評價,得出該試紙條的批內(nèi)檢測回收率為80%~110%,批內(nèi)變異系數(shù)在15%以內(nèi),批間回收率為80%~100%,批間變異系數(shù)在15%以內(nèi);且AOZ、AHD、SEM和AMOZ之間的交叉反應(yīng)率小于0.1%,說明成功將熒光免疫層析技術(shù)和多元檢測技術(shù)相結(jié)合,應(yīng)用于同時檢測4 種硝基呋喃類代謝物,且試紙條的靈敏度和準(zhǔn)確性高、特異性好。
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