
為建立定量檢測(cè)牦牛肉中阿維菌素殘留的時(shí)間分辨熒光免疫層析方法,以羧基化銪微球作為熒光標(biāo)記物,與阿維菌素鼠單克隆抗體G10703進(jìn)行共價(jià)偶聯(lián)后噴涂于釋放墊上,將阿維菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分別包被于硝酸纖維素膜上作為檢測(cè)線(T)和質(zhì)控線(C),制備免疫層析試紙條;利用牦牛肉樣本阿維菌素添加量和對(duì)應(yīng)的T線與C線熒光信號(hào)峰值比值(T/C)擬合得到四參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立牦牛肉中阿維菌素殘留的時(shí)間分辨熒光免疫層析檢測(cè)方法,并對(duì)所建立方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、特異性、精密度和穩(wěn)定性等進(jìn)行評(píng)價(jià),用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法對(duì)所建立方法的性能進(jìn)行確證。結(jié)果表明:本方法對(duì)牦牛肉中阿維菌素的定量限為1.0 μg/kg,加標(biāo)回收率為86.9%~105.2%,與阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素及依普菌素的交叉反應(yīng)率分別為100.0%、73.1%、42.6%和97.5%,批內(nèi)變異系數(shù)為5.4%~9.5%,批間變異系數(shù)為7.5%~11.2%,該方法準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度均較高,且性能穩(wěn)定。
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