
為實(shí)現(xiàn)肉制品中動(dòng)物源性成分的定量檢測(cè),基于微滴式數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR),以雞的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-3基因、豬的朊蛋白基因和牛的生長(zhǎng)激素基因?yàn)榘谢颍⑾隳c制品中雞、豬、牛源性成分的定量檢測(cè)方法。結(jié)果表明:所建立ddPCR方法特異性強(qiáng),能特異性檢測(cè)相應(yīng)的雞、豬、牛源性成分;根據(jù)肉粉質(zhì)量(mg)與DNA質(zhì)量濃度(ng/μL)、DNA質(zhì)量濃度(ng/μL)與基因拷貝數(shù)濃度(copies/μL)之間的線性關(guān)系,得到雞肉粉、豬肉粉和牛肉粉質(zhì)量(x1)與基因拷貝數(shù)濃度( y 2) 之間的關(guān)系式為: 雞:x1=(n*y2)/273.946 - n/886.557 + 0.216; 豬:x1=(n*y2)/64.950 + n/60.644 + 0.215; 牛:x1=(n*y2)/62.839 + n/12.646 + 1.218(n為稀釋倍數(shù));基于建立的ddPCR方法對(duì)64 份市售不同種類(lèi)香腸樣品進(jìn)行檢測(cè),在1 份原料標(biāo)識(shí)僅為“豬肉”的香腸中檢出雞源性成分含量為18.68%。本研究建立的ddPCR方法能夠?qū)崿F(xiàn)香腸中雞、豬、牛源性成分的準(zhǔn)確定量檢測(cè),并可以此判斷“蓄意摻假”或“無(wú)意帶入”。
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