領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
通過比對5個(gè)不同地區(qū)牦牛線粒體基因的差異，篩選出用于鑒定當(dāng)雄高山牦牛的11 個(gè)單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms，SNP）位點(diǎn)，將這些SNP位點(diǎn)作為引物3′端，同時(shí)引入引物堿基錯(cuò)配理念，設(shè)計(jì)出8 對特異性引物，構(gòu)建出2 個(gè)三重和1 個(gè)二重實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time polymerase chain reaction，RT-PCR）體系，建立一種基于SNP位點(diǎn)和多重RT-PCR技術(shù)鑒別當(dāng)雄高山牦牛肉的方法。結(jié)果表明：該方法特異性較好、簡便快捷、結(jié)果直觀可靠，能夠有效鑒別當(dāng)雄高山牦牛肉；方法中3 個(gè)RT-PCR反應(yīng)體系擴(kuò)增產(chǎn)物對應(yīng)的熔解溫度（melting temperature，Tm）范圍分別為反應(yīng)體系A(chǔ)：73.1～75.2、76.0～77.3、79.0～80.0 ℃，反應(yīng)體系B：69.5～72.8、75.0～77.9、78.5～80.0 ℃，反應(yīng)體系C：76.1～78.1、79.5～80.7 ℃；根據(jù)3 個(gè)反應(yīng)體系中熔解曲線峰的有無以及Tm是否符合取值范圍來判定樣品是否為當(dāng)雄高山牦牛肉；市售樣品測定結(jié)果表明，該方法可用于實(shí)際樣品中當(dāng)雄高山牦牛肉的快速鑒別。
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