
以雞轉(zhuǎn)化生長因子β-3(transforming growth factor beta-3,TGFB3)基因、豬朊蛋白(prion protein,PRNP)基因和鴨、牛生長激素(growth hormone,GH)基因?yàn)榘谢颍O(shè)計合成特異性引物和TaqMan探針,通過對實(shí)時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)體系和反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立同時檢測速凍食品中雞、鴨、豬和牛源性成分的實(shí)時熒光PCR檢測方法。結(jié)果表明:本研究所建立的方法只在雞、鴨、豬或牛源性成分存在時才產(chǎn)生特異性擴(kuò)增曲線,表明該方法具有良好的特異性;且對雞、鴨、豬和牛源性成分的最低檢測質(zhì)量濃度分別可達(dá)到10.0、1.0、10.0、10.0 pg/μL,具有良好的靈敏性;應(yīng)用建立的檢測方法對市售34 份速凍食品雞、鴨、豬和牛源性成分進(jìn)行同時檢測,能夠?qū)崿F(xiàn)對速凍食品中4 種動物源性成分的有效檢測,進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),15 份速凍食品源性成分測定結(jié)果與外包裝標(biāo)注成分不一致。本研究所建立的同時檢測速凍食品中雞、鴨、豬和牛源性成分的實(shí)時熒光PCR檢測方法具有良好的特異性和靈敏性,且操作簡單、適用范圍廣,能夠滿足日常檢測需求。
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