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豆豉纖溶酶基因的異源表達(dá)及其重組菌在淡豆豉中的應(yīng)用
來(lái)源:導(dǎo)入 閱讀量: 89 發(fā)表時(shí)間: 2025-02-18
作者: 徐菁雯,烏日娜,王偉明,閻亦然,向雪琴,趙玉蓮,武俊瑞,王亞琦,鄧麗,童星,史海粟
關(guān)鍵詞: 豆豉纖溶酶;異源表達(dá);畢赤酵母;淡豆豉
摘要:

從不同來(lái)源及不同發(fā)酵階段的淡豆豉中分離篩選出65 株優(yōu)勢(shì)菌,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定纖溶酶活性,得到一株高產(chǎn)纖溶酶的貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)20-1,并擴(kuò)增其纖溶酶基因,在畢赤酵母中異源表達(dá),獲得高產(chǎn)纖溶酶的重組菌株P(guān)ichia pastoris pPIC9K-his-aprEBS2,重組菌中該基因表達(dá)水平是出發(fā)菌株的5.8 倍,培養(yǎng)48 h后纖溶酶活性達(dá)到(3 025.59±201.27)U/mL,是出發(fā)菌株的8.9 倍;經(jīng)優(yōu)化,其活性可達(dá)(8 698.24±180.73)U/mL。通過(guò)急性毒性實(shí)驗(yàn)證明,該重組菌無(wú)毒。利用該重組菌純種發(fā)酵淡豆豉,淡豆豉中纖溶酶活性達(dá)到(17 287.02±103.20)U/g,通過(guò)理化指標(biāo)監(jiān)測(cè)、感官特性分析及電子舌分析,重組菌可以提高淡豆豉的感官及風(fēng)味。重組菌發(fā)酵的淡豆豉成品血栓溶解率可達(dá)到(60.55±1.58)%,高于市售淡豆豉。

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