
為高效利用大鯢加工副產(chǎn)物大鯢皮,對(duì)大鯢皮膠原抗氧化肽的制備及分離純化進(jìn)行研究。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率為評(píng)價(jià)指標(biāo)評(píng)價(jià)其抗氧化活性,研究大鯢皮膠原抗氧化肽的制備工藝,確定最適工藝條件,即酶添加量8 000 U/g、酶解pH 9.0、酶解溫度55 ℃、酶解時(shí)間4 h。在此工藝條件下,大鯢皮膠原抗氧化肽DPPH自由基清除率為40.2%。采用超濾分離得到分子質(zhì)量不同的3 個(gè)組分,即P1(>6 kDa)、P2(3~6 kDa)、P3(<3 kDa),其中P3具有較強(qiáng)的抗氧化活性,DPPH自由基清除率為56.7%。在此基礎(chǔ)上,進(jìn)一步采用凝膠色譜技術(shù)分離,通過Sephadex G-25分離純化P3,得到不同分子質(zhì)量的3 個(gè)組分(SP1、SP2、SP3),其中SP3具有較強(qiáng)的抗氧化活性,DPPH自由基清除率為72.3%。最后采用氨基酸自動(dòng)分析儀技術(shù)進(jìn)一步分析SP3的氨基酸組成,探尋大鯢皮膠原肽抗氧化活性與其氨基酸組成之間的內(nèi)在聯(lián)系。結(jié)果表明:大鯢皮膠原抗氧化肽氨基酸組成中,甘氨酸、脯氨酸含量較高,胱氨酸含量較低,這一特征符合膠原抗氧化肽的氨基酸組成特征;除甘氨酸、脯氨酸含量較高外,大鯢皮膠原蛋白抗氧化肽中還含有較高含量的具有明顯抗氧化活性的丙氨酸、精氨酸、谷氨酸、亮氨酸等氨基酸,這可能是大鯢皮膠原抗氧化肽SP3具有較高抗氧化活性的原因。
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