
以膨腹海馬(Hippocampus abdominalis)為原料,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率為指標(biāo),優(yōu)化海馬酶解物提取工藝。根據(jù)DPPH自由基清除率,從堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶中篩選出最優(yōu)堿性蛋白酶進(jìn)行工藝優(yōu)化,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,通過Box-Behnken中心復(fù)合設(shè)計(jì)數(shù)學(xué)模型,采用響應(yīng)曲面對(duì)酶解時(shí)間、pH值、酶底物比例(enzyme/substrate,E/S)進(jìn)行考察,篩選出最佳的酶解工藝,并進(jìn)行體外抗氧化能力的驗(yàn)證。結(jié)果表明,膨腹海馬最佳酶解工藝為料液比1∶20、pH 11、E/S 7.581%、酶解溫度50 ℃、酶解時(shí)間3 h,在此條件下DPPH自由基清除率能達(dá)64.62%。因此,響應(yīng)曲面優(yōu)化膨腹海馬酶解物的提取工藝能夠在較短時(shí)間內(nèi)酶解得到抗氧化活性較高的活性肽。
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