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免疫磁珠-環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增快速檢測(cè)牛肉中的鼠傷寒沙門氏菌與金黃色葡萄球菌
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 238 發(fā)表時(shí)間: 2019-09-26
作者: 呂 觀,常彥磊,石 磊
關(guān)鍵詞: 鼠傷寒沙門氏菌;金黃色葡萄球菌;免疫磁珠;環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增;牛肉
摘要:

建立免疫磁珠分離(immunomagnetic separation,IMS)聯(lián)合環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技術(shù)檢測(cè)牛肉中鼠傷寒沙門氏菌與金黃色葡萄球菌的方法。用生物素標(biāo)記的鼠傷寒沙門氏菌抗體和生物素標(biāo)記的金黃色葡萄球菌菌體蛋白抗體對(duì)鏈霉親和素磁珠進(jìn)行功能化,從牛肉中捕獲和分離目標(biāo)致病菌。結(jié)果表明:經(jīng)優(yōu)化后,每毫克磁珠與10 μL鼠傷寒沙門氏菌抗體偶聯(lián),400 μL鼠傷寒沙門氏菌免疫磁珠在45 min內(nèi)對(duì)104 CFU/mL鼠傷寒沙門氏菌的捕獲率為52.16%;每毫克磁珠與6 μL金黃色葡萄球菌抗體偶聯(lián),300 μL金黃色葡萄球菌免疫磁珠在30 min內(nèi)對(duì)104 CFU/mL金黃色葡萄球菌的捕獲率為56.80%;建立的IMS-LAMP方法特異性高,對(duì)牛肉中鼠傷寒沙門氏菌的檢測(cè)靈敏度為1.2×103 CFU/mL,對(duì)金黃色葡萄球菌的檢測(cè)靈敏度為4.4×104 CFU/mL;富集5 h后,鼠傷寒沙門氏菌的檢測(cè)限可至1.2 CFU/mL,富集7 h后,金黃色葡萄球菌的檢測(cè)限可降至4.4 CFU/mL。建立的IMS-LAMP方法用時(shí)短,靈敏度高,操作簡(jiǎn)單,可以有效檢測(cè)牛肉中的鼠傷寒沙門氏菌和金黃色葡萄球菌。

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