
多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PGA)在食品加工領(lǐng)域中具有良好的應(yīng)用前景。本研究旨在實(shí)現(xiàn)煙曲霉(Aspergillus fumigatus)HBFH5來(lái)源的嗜熱多聚半乳糖醛酸酶AfPGA的異源表達(dá)及性質(zhì)表征,并探究其制備菠蘿皮果膠低聚糖(pectin oligosaccharides,POS)的應(yīng)用潛力。結(jié)果表明,多聚半乳糖醛酸酶AfPGA屬于GH28家族,蛋白分子質(zhì)量為39.2 kDa,最適溫度為70 ℃,在55 ℃處理1 h酶活力基本維持穩(wěn)定;最適pH值為5.0,在pH 2.0~12.0范圍內(nèi)處理1 h能維持80%以上活力;對(duì)多種金屬離子和化學(xué)試劑具有較強(qiáng)的抗性。以多聚半乳糖醛酸為底物時(shí),重組酶AfPGA的Km為1.05 mg/mL,Vmax為52.6 μmol/(min·mg)。分子動(dòng)力學(xué)模擬分析發(fā)現(xiàn),常溫多聚半乳糖醛酸酶ADPG2的均方根偏差和均方根波動(dòng)均高于嗜熱多聚半乳糖醛酸酶AfPGA,除此以外,重組酶AfPGA制備的菠蘿皮POS具備較強(qiáng)的抗菌活性,能夠明顯抑制沙門氏菌(Salmonella)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichia coli)和志賀氏菌(Shigella)生長(zhǎng),同時(shí)菠蘿皮POS還具備良好的抗氧化性能。本研究豐富了嗜熱半乳糖醛酸酶資源,可為該酶在POS的制備應(yīng)用中提供一定的理論支撐。
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