領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為實(shí)現(xiàn)食品中唐菖蒲伯克霍爾德氏菌椰毒致病變種（Burkholderia gladioli pv. cocovenenans）的快速檢測(cè)，基于體溫?cái)U(kuò)增技術(shù)——酶促重組等溫?cái)U(kuò)增（enzymatic recombinase amplification，ERA），并根據(jù)唐菖蒲伯克霍爾德氏菌椰毒致病變種bonM基因序列設(shè)計(jì)和篩選了ERA檢測(cè)引物和探針，分別建立ERA顯色法、熒光法、試紙條法3 種可視化快速檢測(cè)方法，并評(píng)估其特異性和靈敏度，以及在市售樣品檢測(cè)適用性和準(zhǔn)確性。結(jié)果顯示，建立的方法對(duì)3 株唐菖蒲伯克霍爾德氏菌椰毒致病型菌株均有擴(kuò)增，其他常見(jiàn)的食源性致病菌以及其他唐菖蒲伯克霍爾德氏菌均無(wú)擴(kuò)增，說(shuō)明檢測(cè)方法的特異性良好。3 種方法的檢出限均為10－2 ng/μL，靈敏度較好。采用建立的3 種可視化快速檢測(cè)方法對(duì)15 份市售樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢出陽(yáng)性2 份，檢出率為13.3%。該結(jié)果與國(guó)標(biāo)方法的檢測(cè)結(jié)果一致，說(shuō)明方法具有較好的適用性和準(zhǔn)確性。本研究建立的基于體溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的顯色法、熒光法和試紙條法具有較高的特異性及靈敏度，37 ℃體溫?cái)U(kuò)增15 min左右即可獲取檢測(cè)結(jié)果，且裸眼可視，可為食品中唐菖蒲伯克霍爾德氏菌椰毒致病變種的現(xiàn)場(chǎng)可視化快速篩查提供新型簡(jiǎn)便的策略。
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