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4 種植物源性成分多重real-time PCR檢測(cè)方法的建立及其在食用淀粉中的應(yīng)用
來(lái)源:導(dǎo)入 閱讀量: 139 發(fā)表時(shí)間: 2024-02-20
作者: 范維,高曉月,董雨馨,劉虹宇,李賀楠,趙文濤,郭文萍
關(guān)鍵詞: 多重實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);食用淀粉;木薯;紅薯;馬鈴薯;玉米
摘要:

建立一種可同時(shí)快速檢測(cè)紅薯、木薯、馬鈴薯、玉米源性成分的多重實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。分別以紅薯g3pdh基因、木薯g3pdh基因、馬鈴薯UGPase基因、玉米zSSIIb基因?yàn)榘谢蛟O(shè)計(jì)特異性引物和TaqMan探針,以18S rRNA基因?yàn)閮?nèi)參基因,建立多重real-time PCR方法,開(kāi)展方法學(xué)驗(yàn)證,并對(duì)不同摻入比例模擬樣品和實(shí)際淀粉樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示,該方法具有高通量、特異性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。與15 種非目標(biāo)源性均無(wú)交叉反應(yīng);對(duì)目標(biāo)DNA的檢測(cè)靈敏度可達(dá)到3×10-3 ng/μL,且具有良好的線性關(guān)系和擴(kuò)增效率;對(duì)淀粉樣品的檢出限可達(dá)0.1%,對(duì)50 份實(shí)際樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果與參比方法一致,說(shuō)明建立的多重real-time PCR法可用于食用淀粉種類(lèi)摻假鑒別檢測(cè)。

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