
參照GB/T 25165—2010《明膠中牛、羊、豬源性成分的定性檢測(cè)方法 實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法》,以牛的生長(zhǎng)激素(growth hormone,GH)基因和豬的朊蛋白(prion protein,PRNP)基因2 種核基因?yàn)榘谢蚝铣商禺愋砸锖吞结槨@碚撏茖?dǎo)單位質(zhì)量牛肉的GH基因與豬肉PRNP基因拷貝數(shù)之比為一固定值,通過微滴式數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)方法對(duì)該固定值進(jìn)行檢測(cè)和驗(yàn)證,并以該固定值對(duì)牛肉/豬肉人工混合樣本和市售牛肉制品中的豬肉成分進(jìn)行定量檢測(cè)。結(jié)果表明:該方法具有良好的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性;牛肉中摻雜豬肉質(zhì)量分?jǐn)?shù)在5%~99%范圍內(nèi)時(shí),檢測(cè)結(jié)果絕對(duì)誤差小于1.28%,變異系數(shù)小于6.5%,豬肉成分的回收率為99.09%~102.80%;20 份牛肉制品中,4 份檢出豬肉成分,其中3 份的相對(duì)含量為29.19%~98.15%,1 份為0.12%(低于本方法檢出限5%)。因此,ddPCR方法可以較好地應(yīng)用于牛肉制品中摻雜豬肉成分的定量檢測(cè)。
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