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Bacillus sp. Y112環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶位點(diǎn)R81定點(diǎn)突變提高產(chǎn)物特異性
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 174 發(fā)表時間: 2021-07-13
作者: 李曉涵,郭姣梅,宋凱,孫晶晶,王偉,郝建華,
關(guān)鍵詞: 環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶;定點(diǎn)突變;環(huán)糊精;產(chǎn)物特異性
摘要:

通過對來源于海洋芽孢桿菌Y112的環(huán)糊精葡糖基轉(zhuǎn)移酶進(jìn)行同源建模及氨基酸序列比對,發(fā)現(xiàn)N末端81位精氨酸可能影響環(huán)糊精產(chǎn)物特異性。本研究通過定點(diǎn)突變將第81位點(diǎn)處的精氨酸突變?yōu)樘K氨酸,降低了α-環(huán)糊精的生成量,將β-環(huán)糊精的比例從64%上升至71%,提高了產(chǎn)物的專一性。分析原因可能與取代氨基酸殘基的大小及氫鍵作用力的變化有關(guān)。同時,突變酶的酶學(xué)性質(zhì)方面保持了原始酶的嗜熱性、熱穩(wěn)定性及耐堿性。

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