
將大麥芽提取的極限糊精酶粗酶液,利用硫酸銨沉淀、離子交換層析和凝膠過濾色譜等分離方法對(duì)極限糊精酶進(jìn)行逐步分離純化。結(jié)果表明:純化倍數(shù)為31.23,回收率為8.81%。經(jīng)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳后,圖譜顯示樣品具有較高的純度,分子質(zhì)量約為97kD。同時(shí)研究了純化前后極限糊精酶在不同作用環(huán)境下酶的活性變化,發(fā)現(xiàn)純化后樣品在溫度45℃和pH 5.5左右具有最大酶活性,與粗酶液中酶活性相比具有明顯差異。在體系中添加不同濃度的金屬離子,結(jié)果發(fā)現(xiàn),Mg2+、Ca2+、Mn2+在濃度較低時(shí),對(duì)酶活性具有激活作用,而濃度較高時(shí),則具有抑制作用;整體上,K+對(duì)酶活性影響不大;Zn2+、Fe2+對(duì)酶活性具有抑制作用。
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