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新型生物防腐劑——多聚陽(yáng)離子抗菌肽在畢赤酵母中的表達(dá)
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 185 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 李 青,周曉宏
關(guān)鍵詞: 多聚陽(yáng)離子;抗菌肽;畢赤酵母;防腐劑
摘要:

在畢赤酵母GS115中表達(dá)一種新型食品生物防腐劑——多聚陽(yáng)離子抗菌肽(poly-cationic antibacterialpeptide,PCAP)。根據(jù)畢赤酵母密碼子的偏愛性,人工合成編碼多聚陽(yáng)離子抗菌肽與多聚陰離子肽融合肽的DNA序列,連接并克隆入酵母表達(dá)載體pPIC9,得到重組表達(dá)質(zhì)粒pPIC9-PCAP,并轉(zhuǎn)化至畢赤酵母GS115,篩選陽(yáng)性克隆子,用體積分?jǐn)?shù)0.5%的甲醇誘導(dǎo)表達(dá),優(yōu)化表達(dá)條件,表達(dá)產(chǎn)物用Tricine-SDS-PAGE分析,在分子質(zhì)量8kD左右處可見目的蛋白表達(dá)條帶,表明融合肽成功地在畢赤酵母中分泌表達(dá)。在pH2.0條件下將表達(dá)產(chǎn)物采用胃蛋白酶酶解,分離得到的堿性多聚陽(yáng)離子肽對(duì)食品腐敗微生物枯草芽孢桿菌具有明顯的抑菌作用。

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