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芝麻過敏原油質(zhì)蛋白O leosins單克隆抗體的制備與鑒定
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 155 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 王媛媛,鄒 菊,劉志剛
關(guān)鍵詞: 芝麻油質(zhì)蛋白;單克隆抗體;特性鑒定
摘要:

利用細(xì)胞融合技術(shù)制備小鼠抗油質(zhì)蛋白雜交瘤細(xì)胞,通過間接ELISA方法篩選穩(wěn)定分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞株。獲得10株雜交瘤細(xì)胞,分別命名為1B2、2D8、2F3、3A4、3D7、3F8、4A10、4F12、6A12、6E7,利用Ig亞類鑒定試劑盒鑒定各單克隆抗體的Ig亞型,除1B2、3D7、3F8為IgG1類外其余均為IgG2a類型。將雜交瘤細(xì)胞株注射入小鼠腹腔獲取腹水,應(yīng)用Protein A親和層析法對腹水進(jìn)行純化。單抗效價有9株在2.0×105以上。ELISA和Western blotting分析表明這些單抗均能特異性識別芝麻過敏原油質(zhì)蛋白。

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