領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
通過(guò)正交設(shè)計(jì)對(duì)影響茶樹(shù)聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)反應(yīng)體系的主要因素進(jìn)行優(yōu)化，快速確立適合茶樹(shù)葉綠體DNA PCR-RFLP分析的擴(kuò)增體系和酶切體系。結(jié)果表明：最佳PCR擴(kuò)增體系為100ng模板DNA、200μmol/L dNTPs、1.5mmol/L MgCl2、50ng葉綠體引物、3U TaqDNA聚合酶、加ddH2O至25μL；最佳酶切體系為6μL擴(kuò)增產(chǎn)物用量、2U限制性內(nèi)切酶量、1×限制性內(nèi)切酶buffer、加ddH2O至15μL，37℃酶切6h。利用優(yōu)化的反應(yīng)體系，對(duì)30個(gè)茶樹(shù)品種葉綠體DNA進(jìn)行PCR-RFLP擴(kuò)增，可獲得清晰擴(kuò)增圖譜和多態(tài)性酶切圖譜。
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