領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
根據(jù)編碼金黃色葡萄球菌腸毒素A的sea基因、編碼耐熱核酸酶的nuc基因?yàn)槟康幕颍O(shè)計(jì)兩對特異性引物，利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)合變性高效液相色譜技術(shù)，建立水產(chǎn)品中金黃色葡萄球菌的雙重PCR-DHPLC檢測方法。以30株參考菌株進(jìn)行特異性實(shí)驗(yàn)，除所試8株金葡菌出現(xiàn)目的片段和陽性吸收峰外，其余菌株均未檢測到目的片段與陽性吸收峰，表明該方法具有良好的特異性。靈敏性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，檢測靈敏度達(dá)到菌液濃度50CFU/mL，比普通的凝膠電泳高一個數(shù)量級。利用建立的雙重PCR-DHPLC檢測方法對240份水產(chǎn)品進(jìn)行檢測，共檢出22株金黃色葡萄球菌，檢出率為9.2%，其中含有腸毒素基因有8株，占總樣本的3.3%，與國標(biāo)法檢出陽性率比較無顯著差異，證明該方法具有良好的實(shí)用性。實(shí)驗(yàn)證明，本研究建立的雙重PCR-DHPLC方法不僅可以特異、靈敏、簡便快速且高通量的實(shí)現(xiàn)對水產(chǎn)品中金葡菌的檢測，而且也可通過對腸毒素基因的分析，方便地判斷出該菌株致病性的強(qiáng)弱。
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