領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
高絲氨酸脫氫酶(HSD)是天冬氨酸族氨基酸合成途徑的關(guān)鍵酶，在蘇氨酸和蛋氨酸生物合成中起到重要作用。將來(lái)自于北京棒桿菌AS1.299的HSD在E. coli BL21(DE3)中成功構(gòu)建并進(jìn)行高效異源表達(dá)。通過(guò)分子對(duì)接與同源序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)，206位點(diǎn)參與底物結(jié)合，并且在家族中高度保守，因此對(duì)突變體D206G進(jìn)行研究。結(jié)果表明：突變體最適pH7.5，最適反應(yīng)溫度37℃，半衰期為4h，并對(duì)金屬離子和有機(jī)溶劑顯示出良好的抗性。同野生型相比，突變體Km值減小，可能是由于側(cè)鏈官能團(tuán)減小，空間位阻降低，有利于底物結(jié)合。
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