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單增李斯特菌和金黃色葡萄球菌雙重熒光定量PCR檢測方法建立
來源：食品科學網 閱讀量: 131 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 邵美麗，董 鑫，趙燕麗，孔保華，劉思國
關鍵詞: TaqMan探針；單增李斯特菌hlyA基因；金黃色葡萄球菌nuc基因；熒光定量聚合酶鏈式反應
摘要:

根據GenBank公布的單增李斯特菌的hlyA基因序列和金黃色葡萄球菌的nuc基因序列各設計一對引物和一條探針，建立基于TaqMan探針的單增李斯特菌和金黃色葡萄球菌雙重熒光定量聚合酶鏈式反應(PCR)檢測方法。該方法對所有目標菌株均產生特異性擴增曲線，其他非目標菌均不產生擴增曲線，具有較強的特異性。且該法對陽性重組質粒pMD18-hlyA和pMD18-nuc同時定量擴增的敏感度分別為19.5拷貝/μL和18.7拷貝/μL。同步檢測人工染菌肉樣中單增李斯特菌和金黃色葡萄球菌的最低檢出限均為102CFU/g。

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