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—— 中國食品雜志社
為建立適用于一類雜環(huán)胺的酶聯(lián)免疫吸附檢測方法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA），利用改良的碳化二亞胺法將在2-氨基-3,4,8-三甲基咪唑[4,5-f]-喹喔啉（2-amino-3,4,8-trimethyl-3H-imidazo[4,5-f]quinoxaline，4,8-DiMeIQx）的2-氨基處連接丁二酸單甲酯酰氯制備的半抗原偶聯(lián)蛋白獲得人工抗原。該方法利用適當pH值的緩沖體系，將酯的水解和蛋白偶合一步完成，與傳統(tǒng)方法相比，有效地節(jié)省了反應時間和成本，且對人工抗原的紫外掃描驗證和多克隆抗體效價檢測結果都直接和間接地表明偶合是成功的。最終免疫獲得4,8-DiMeIQx結構類似物的多克隆抗體，該抗體的最高效價為1∶450 000，且經(jīng)直接競爭ELISA檢測，該抗體對目標物4,8-DiMeIQx的靈敏度（IC50）為24.0 μg/L，最低檢測限（IC15）為1.8 μg/L，對其結構類似物7,8-DiMeIQx、8-MeIQx、2-氨基-3-甲基咪唑[4,5-f]-喹喔啉（IQx）、2-氨基-3,4,7,8-四甲基咪唑[4,5-f]-喹喔啉（TriMeIQx）的靈敏度分別為35.0、30.0、28.0、40.0 μg/L，而其他與目標物結構相差較大的雜環(huán)胺，像2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑[4,5-b]吡啶（PhIP）、2-氨基-3-甲基咪唑[4,5-f]喹啉（IQ）和2-氨基-3,4-二氨基咪唑[4,5-f]喹啉（2-amino-3,4-dimethyl-imidazo[4,5-f]quinoline，MeIQ），它們幾乎不與抗體結合（CR＜0.01%）。由此可見，可以利用該抗體建立高效快速的雜環(huán)胺ELISA檢測方法用以定量或定性檢測肉類加工食品中的一類雜環(huán)胺。
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