領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
目的：設(shè)計(jì)對(duì)比實(shí)驗(yàn)，以冷凍草莓為材料，研究樣品中所含抑制劑對(duì)諾如病毒熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）檢測(cè)結(jié)果的影響，優(yōu)化提高檢測(cè)靈敏度與準(zhǔn)確率。方法：GⅡ型諾如病毒便懸液的制備與RNA提取，已知陰性冷凍草莓樣品進(jìn)行前處理、病毒富集、病毒RNA提取純化，分組（對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組），抑制劑去除，熒光定量RT-PCR檢測(cè)。結(jié)果：隨著病毒濃度的梯度遞減，抑制劑影響作用呈明顯增強(qiáng)趨勢(shì)，導(dǎo)致在高于正常檢測(cè)最低限度兩個(gè)數(shù)量級(jí)的水平，即出現(xiàn)假陰性結(jié)果；抑制劑去除的實(shí)驗(yàn)組檢測(cè)結(jié)果，隨著病毒濃度梯度的遞減明顯優(yōu)于未經(jīng)處理的對(duì)照組；抑制劑去除的實(shí)驗(yàn)組穩(wěn)定檢出限為10－6（Ct值小于40），最低檢出限為10－7（諾如病毒（norovirus，NoV）濃度梯度檢測(cè)最低檢出限為10－5）。結(jié)論：抑制劑去除可明顯優(yōu)化冷凍草莓中NoV熒光定量RT-PCR檢測(cè)，提高檢測(cè)方法的靈敏度，且操作簡(jiǎn)便快捷，檢測(cè)成本浮動(dòng)不大，期望應(yīng)用于日常檢測(cè)工作中。
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