領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
探討熊果酸通過改善高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞線粒體功能障礙，延緩足細(xì)胞損傷及凋亡的作用及作用機(jī)制。采用CCK-8法確定實(shí)驗(yàn)條件，實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組（CN組）、高糖組（200 mmol/L葡萄糖，HG組）、低劑量熊果酸組（200 mmol/L葡萄糖＋0.703 μmol/L熊果酸）、中劑量熊果酸組（200 mmol/L葡萄糖＋1.406 μmol/L熊果酸）、高劑量熊果酸組（200 mmol/L葡萄糖＋2.813 μmol/L熊果酸）。免疫熒光法觀察線粒體形態(tài)，檢測活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平、線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（mitochondrial permeability transition pore，mPTP）開放度、線粒體膜電位（mitochondrial membrane potential，MMP）；流式細(xì)胞術(shù)檢測ROS水平和足細(xì)胞凋亡率；Western Blot檢測親環(huán)蛋白D（cyclophilin D，Cyp D）、電壓依賴性陰離子通道（voltage-dependent anion channel，VDAC）、Bcl-2相關(guān)X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）、B淋巴細(xì)胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、細(xì)胞色素c（cytochrome c，Cyt c）蛋白的表達(dá)。結(jié)果：CCK-8結(jié)果顯示，與CN組比較，足細(xì)胞在葡萄糖200 mmol/L干預(yù)劑量下，細(xì)胞增殖率顯著降低（P＜0.01），故確定葡萄糖200 mmol/L為細(xì)胞造模劑量；與HG組比較，熊果酸在0.703、1.406、2.813 μmol/L劑量下，顯著提高足細(xì)胞增殖率（P＜0.01）；免疫熒光結(jié)果顯示，與HG組比較，熊果酸不同劑量均能夠顯著恢復(fù)線粒體形態(tài)、抑制ROS過度產(chǎn)生、抑制mPTP異常開放、提高M(jìn)MP；流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示：與HG組比較，熊果酸不同劑量均能降低足細(xì)胞凋亡率；Western Blot結(jié)果表明，與HG組比較，不同劑量熊果酸均顯著下調(diào)Cyp D、VDAC、Bax、Cyt c蛋白的表達(dá)，上調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)。結(jié)論：熊果酸可通過抑制HG誘導(dǎo)的足細(xì)胞氧化應(yīng)激所導(dǎo)致的線粒體功能障礙及細(xì)胞凋亡發(fā)揮其防治糖尿病腎病的作用。
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