領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為研究食用菌多肽的免疫調(diào)節(jié)作用，以杏鮑菇干粉為原料，通過(guò)堿提酸沉法提取杏鮑菇粗蛋白，再經(jīng)胃蛋白酶、胰蛋白酶復(fù)合酶解，將獲得的杏鮑菇粗蛋白酶解液通過(guò)超濾分離、Sephadex G-15葡聚糖凝膠柱層析及高效液相色譜法分離進(jìn)行純化，并構(gòu)建RAW264.7巨噬細(xì)胞模型，測(cè)定其增殖率、NO釋放率、吞噬率和細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量，對(duì)各組分進(jìn)行篩選。結(jié)果表明，＞10、5～10、3～5 kDa和＜3 kDa 4 種分子質(zhì)量不同的超濾純化組分中，＜3 kDa組分的免疫活性最高。Sephadex G-15和高效液相色譜法分離獲得免疫活性最高的組分Peak 2-2。利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)Peak 2-2組分進(jìn)行de novo測(cè)序，根據(jù)可信度評(píng)分（≥99），篩選獲得51 條多肽序列。最后，利用分子對(duì)接手段確定杏鮑菇多肽DFPALR和LLGVD與TLR4蛋白的結(jié)合穩(wěn)定，通過(guò)分子動(dòng)力學(xué)模擬技術(shù)確定兩條多肽與TLR4蛋白的結(jié)合是可自發(fā)的、穩(wěn)定的。本研究表明杏鮑菇多肽具有良好的免疫調(diào)節(jié)活性。
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