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—— 中國食品雜志社
為探究抗菌肽LL-1對沙門氏菌的抗菌效果及機(jī)制，首先通過倍比稀釋法測定LL-1對沙門氏菌的最小抑菌濃度（minimal inhibitory concentration，MIC），并以抗菌曲線評價(jià)LL-1對沙門氏菌的抗菌效果；然后，使用掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察細(xì)菌形態(tài)，通過檢測核酸、蛋白質(zhì)、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）的泄漏情況以及碘化丙啶（propidium iodide，PI）染色實(shí)驗(yàn)，評價(jià)LL-1對沙門氏菌細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的影響，通過核酸凝膠電泳觀察LL-1與沙門氏菌DNA結(jié)合情況；最后，通過檢測胞內(nèi)琥珀酸脫氫酶（succinate dehydrogenase，SDH）、NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-malate dehydrogenase，NADP-MDH）活性以及腺嘌呤核苷三磷酸（adenosine triphosphate，ATP）含量，評價(jià)LL-1對沙門氏菌能量代謝的影響。結(jié)果表明：LL-1對沙門氏菌的MIC為6.25 μg/mL，有良好的抗菌效果，且呈濃度和時(shí)間依賴性；經(jīng)LL-1處理的沙門氏菌出現(xiàn)菌體皺縮、胞膜溶解和質(zhì)壁分離等形態(tài)變化；沙門氏菌經(jīng)LL-1處理后，胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、ALP發(fā)生泄漏，并且經(jīng)PI染色后胞內(nèi)熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，同時(shí)LL-1與DNA發(fā)生結(jié)合；隨著LL-1質(zhì)量濃度的升高，胞內(nèi)ATP含量下降、SDH及NADP-MDH的活性降低。綜上，LL-1能增大沙門氏菌細(xì)胞膜和細(xì)胞壁的通透性引起胞內(nèi)容物泄漏，結(jié)合其DNA，并通過影響細(xì)菌能量代謝等方式抗菌，本實(shí)驗(yàn)可為后續(xù)深入研究LL-1的抗菌機(jī)制和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
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