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基于RAA-CRISPR/Cas12a技術(shù)的桃成分單管一體化快速檢測(cè)方法
來(lái)源:導(dǎo)入 閱讀量: 71 發(fā)表時(shí)間: 2024-11-08
作者: 王琳, 邢冉冉, 于耀鮮, 易秋菊, 盧思遠(yuǎn), 鄧婷婷, 王旭, 陳穎
關(guān)鍵詞: 重組酶介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增;CRISPR/Cas12a;單管一體化;桃成分;快速檢測(cè)
摘要:

通過(guò)設(shè)計(jì)特異性的桃重組酶介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增(recombinase-aided amplification,RAA)和CRISPR RNA(crRNA)引物,建立RAA技術(shù)結(jié)合CRISPR/Cas12a系統(tǒng)的單管一體化桃成分快速檢測(cè)方法,并分析該方法的特異性、靈敏度和檢出限,同時(shí)對(duì)市售樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示,該方法不依賴(lài)大型儀器設(shè)備,在30 min內(nèi)即可完成桃成分的快速檢測(cè);與其他常見(jiàn)水果物種之間無(wú)交叉污染,表現(xiàn)出良好的特異性;該方法的靈敏度為1.0×10-1 ng/μL;檢出限為1%;通過(guò)對(duì)20 份市售樣品檢測(cè),結(jié)果顯示本方法與實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測(cè)結(jié)果一致。因此,本研究建立的RAA-CRISPR/Cas12a單管一體化桃成分快速檢測(cè)方法具有特異性好、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn),為桃成分快速檢測(cè)提供了一種新的技術(shù)。

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