領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為研究豬肉來(lái)源大腸桿菌分離菌株的生物被膜形成及相關(guān)基因表達(dá)變化，首先從生豬屠宰線、豬胴體表面及生鮮豬肉中采用選擇平板和特異性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）分離鑒定大腸桿菌，采用微孔板結(jié)晶紫染色法評(píng)價(jià)分離菌株15 ℃培養(yǎng)72 h時(shí)生物被膜形成能力，進(jìn)而選取代表菌株研究生物被膜形成過(guò)程中被膜量、胞外聚合物（extracellular polymeric substances，EPS）組成，以及基于反轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR的成膜基因表達(dá)的變化。結(jié)果表明：共分離到豬肉源大腸桿菌31 株，包括生豬屠宰線11 株、豬胴體表面4 株、生鮮豬肉16 株；微孔板結(jié)晶紫染色結(jié)果顯示，被膜形成能力存在明顯菌株差異，64.52%菌株成膜能力較弱，選取其中1 株（D4-18）進(jìn)行成膜過(guò)程研究；微孔板中菌株D4-18 15 ℃培養(yǎng)168 h過(guò)程中被膜量持續(xù)增加，培養(yǎng)72 h和168 h時(shí)，菌株D4-18分泌EPS，培養(yǎng)72 h時(shí)，papC、fimH、csgA基因表達(dá)量分別為0.095、0.933、0.435 copies/cm2，隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，松散型EPS中蛋白質(zhì)及多糖含量、緊密型EPS中蛋白質(zhì)含量極顯著增加（P＜0.01），培養(yǎng)168 h時(shí)，papC和fimH基因表達(dá)量增加，csgA基因表達(dá)量無(wú)顯著變化，表明上述基因在大腸桿菌生物被膜形成過(guò)程中發(fā)揮了不同程度的調(diào)控作用。
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