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草魚胰蛋白酶的親和純化及酶學(xué)性質(zhì)
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 169 發(fā)表時間: 2021-07-13
作者: 李晨,高柳芳,崔曉東,韓宇航,朱丹旭,李嬌
關(guān)鍵詞: 草魚;胰蛋白酶;親和純化;酶學(xué)性質(zhì)
摘要:

從草魚肝胰腺中提取胰蛋白酶,經(jīng)勻漿、硫酸銨分級沉淀、透析得到胰蛋白酶粗酶液,通過BTI-Sepharose親和層析一步純化得到電泳純的草魚胰蛋白酶,并進(jìn)一步研究該胰蛋白酶的酶學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明:草魚胰蛋白酶的分子質(zhì)量約為27 kDa,米氏常數(shù)Km為3.4×10-5 mol/L;最適反應(yīng)溫度為60 ℃,在低于60 ℃條件下穩(wěn)定;最適pH值為9.5,酸堿耐受范圍為pH 6.0~12.0;Ba2+、Mg2+、Fe2+在0~10 mmol/L范圍內(nèi)對該酶具有一定激活作用,而乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)、K+在0~10 mmol/L范圍內(nèi)對該酶有一定抑制作用,EDTA較K+對酶的抑制作用更明顯。

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