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海產(chǎn)品貝毒素大田軟海綿酸ELISA及HPLC-MS/MS檢測(cè)方法的研究
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 143 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 盧士英,柳增善,周玉,李巖松張代輝,于光,于師宇,任洪林
關(guān)鍵詞: 大田軟海綿酸|ELISA|HPLC-MS/MS|海產(chǎn)品
摘要:

為了檢測(cè)海產(chǎn)品貝毒大田軟海綿酸,保障其食用安全,利用活潑酯法將小分子OA與載體蛋白偶聯(lián),免疫BALB/c小鼠,細(xì)胞融合技術(shù)建立分泌抗OA的雜交瘤細(xì)胞株,并對(duì)其各種特性進(jìn)行分析;小鼠腹水法大量生產(chǎn)抗體,純化后建立ELISA方法,同時(shí)建立OA的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS)檢測(cè)法,并對(duì)部分市售海產(chǎn)品進(jìn)行了實(shí)際檢測(cè),ELISA方法標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=-34.212x+83.49,相關(guān)系數(shù)為0.9784,線性范圍0.4~25μg/L,靈敏度0.18μg/L;HPLC-MS/MS檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)曲線y=193.07x-780.6(Q1/Q3:m/z 827.4~m/z 723.5)和y=83.021x-335.6(Q1/Q3:m/z 827.4~m/z 809.5),R2 均為0.9991,線性范圍10~800μg/L,靈敏度小于2μg/L,平均RSD為4.34%。在檢測(cè)的實(shí)際樣品中兩種樣品ELISA呈陽(yáng)性反應(yīng),其中一種經(jīng)過(guò)了HPLC-MS/MS的驗(yàn)證。所建立的ELISA及HPLC-MS檢測(cè)方法均可用于海產(chǎn)品腹瀉性貝毒OA限量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè),為進(jìn)出口海產(chǎn)品OA標(biāo)準(zhǔn)方法的建立提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

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