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實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)貝類中的札幌病毒
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 160 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 鄧恬寧,潘良文,*,呂 蓉,高 琴,張舒亞,盧鐘山
關(guān)鍵詞: 札幌病毒|實(shí)時(shí)熒光RT-PCR|檢測(cè)
摘要:

建立檢測(cè)貝類中GⅠ、GⅡ、GⅣ和GⅤ型札幌病毒的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR新方法。首先使用PEG 8000對(duì)貝類中的札幌病毒進(jìn)行富集,然后采用Tri-reagent提取材料中的總RNA,針對(duì)札幌病毒RNA 3'端含Poly A尾的特點(diǎn),使用帶有Poly(dT)25的磁珠對(duì)病毒RNA進(jìn)行純化,用所獲的高純度RNA進(jìn)行四種型別札幌病毒的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)。該方法高效、靈敏,檢測(cè)下限為101數(shù)量級(jí)拷貝,能夠用于日常檢驗(yàn)。

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