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大豆過氧化物酶基因的克隆及其表達(dá)載體的構(gòu)建
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 117 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 曾家豫,袁紅霞,廖世奇,周思彤,梁瓊
關(guān)鍵詞: 大豆過氧化物酶|基因克隆|表達(dá)載體
摘要:

大豆過氧化物酶(soybean peroxidase,sbp)基因的克隆及其表達(dá)載體的構(gòu)建將有利于人們更深入的從分子生物學(xué)角度研究sbp 基因的結(jié)構(gòu)與功能。首先從大豆根中獲取總RNA,通過RT-PCR 獲得sbp 基因。再將sbp 基因與表達(dá)載體pPICZα-A 雙酶切后連接,構(gòu)建重組表達(dá)載體pPICZα-A-sbp。將pPICZα-A-sbp 轉(zhuǎn)化大腸桿菌篩選陽性克隆體并測序。結(jié)果表明:獲得的sbp 基因序列與已報道的sbp[U51191(GmEpa1)]基因序列有92% 的同源性。重組表達(dá)載體pPICZα-A-sbp 的成功構(gòu)建為其在畢赤酵母中表達(dá)奠定了基礎(chǔ)。

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