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韋伯靈芝漆酶的分離純化及其性質(zhì)
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 147 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 陳瓊?cè)A,周玉萍,陳 曉,柯德森,程惠貞,田長(zhǎng)恩
關(guān)鍵詞: 韋伯靈芝|漆酶|純化|酶活
摘要:

采用硫酸銨分級(jí)鹽析、透析、聚乙二醇濃縮和高效液相色譜柱層析從韋伯靈芝TZC-1 發(fā)酵液中分離純化得到電泳純漆酶,其純化倍數(shù)為37.1 倍,酶活性回收率為21.3%。活性-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)結(jié)果表明該漆酶由一種同工酶組成,純化漆酶經(jīng)SDS-PAGE 檢測(cè)顯示為單一條帶,其分子質(zhì)量約為40kD。該漆酶催化底物ABTS 的最適反應(yīng)溫度為50~60℃,最適反應(yīng)pH 值為4.6,在60℃以下和pH3.0~5.0 范圍內(nèi)保持穩(wěn)定,以ABTS為底物的表觀Km 值為13.8μmol/L。Fe2+ 完全抑制酶活,Al3+ 和Mn2+ 對(duì)該漆酶也有明顯抑制作用,Hg+、Cu2+ 和Mg2+ 對(duì)該酶有明顯激活作用,而Zn2+、Ba2+ 及K+ 對(duì)該酶活性影響不大。

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