領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為建立快速、特異的檢測(cè)大腸桿菌O157:H7的實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real time polymerase chain reaction，RT-PCR)方法，針對(duì)大腸桿菌O157:H7的特異基因rfbE設(shè)計(jì)一對(duì)特異引物，建立SYBR GreenⅠ實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)方法，并進(jìn)行靈敏度、重復(fù)性和特異性實(shí)驗(yàn)，同時(shí)與常規(guī)PCR方法進(jìn)行比較。結(jié)果顯示所建立的SYBR GreenⅠ實(shí)時(shí)定量PCR方法可以快速、特異地檢測(cè)出大腸桿菌O157:H7，細(xì)菌純培養(yǎng)物中其靈敏度可達(dá)2×101CFU/mL，臨床模擬污染肉樣中能最低能檢測(cè)到1×102CFU/mL的大腸桿菌O157:H7。與常規(guī)PCR方法相比，SYBR GreenⅠ實(shí)時(shí)定量 PCR方法對(duì)臨床樣品中大腸桿菌O157:H7的檢出率大大提高。本研究建立的SYBR GreenⅠ熒光定量 PCR技術(shù)能快速準(zhǔn)確、特異、敏感地檢測(cè)大腸桿菌O157:H7。
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