領(lǐng)學術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
為能一步快速檢測沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和單增李斯特菌3種食源性致病菌，建立了三重環(huán)介導等溫擴增(LAMP)檢測方法。針對沙門氏菌的侵襲蛋白(invA)基因、金黃色葡萄球菌的耐熱核酸酶(nuc)基因、單增李斯特菌(hly)基因3個高度保守的基因，設(shè)計出3套LAMP引物。以8株代表目標菌株，三重LAMP反應體系中Mg2+濃度4.6mmol/L、擴增溫度61℃。通過電泳檢測、離心觀察沉淀和熒光檢測證明該方法能夠在90min內(nèi)一次性檢出以上3種致病菌。3種菌的檢測靈敏度均約為10fg/μL，是PCR檢測靈敏度(10pg/μL)的1000倍。以無害李斯特菌等常見的20株非目標菌株為對照，證明了此方法的特異性。LAMP產(chǎn)物DNA測序結(jié)果與預期一致，證明了該方法的正確性。該三重LAMP檢測方法具有快速、特異、靈敏度高的優(yōu)點，適用于食品中沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和單增李斯特菌的快速檢測。
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