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植物乳桿菌KLDS1.0391所產(chǎn)細(xì)菌素的純化
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 110 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 王輝,孟祥晨
關(guān)鍵詞: 分子量
摘要:

目的是為了分離純化植物乳桿菌KLDS1.0391代謝產(chǎn)生的細(xì)菌素。采用蛋白質(zhì)層析技術(shù)分離細(xì)菌素,采用質(zhì)譜測(cè)定純化后細(xì)菌素的分子量。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)比對(duì),最終確定的分離純化路線為:植物乳桿菌KLDS1.0391的無(wú)細(xì)胞上清液首先經(jīng)過(guò)飽和度為70%的硫酸銨沉淀,收集的沉淀溶于1/40體積0.02 mol/L的乙酸鈉緩沖液(pH 6.5),復(fù)溶后的樣品采用SP Sepharose fast flow陽(yáng)離子填料和COLUMN XK 16/20層析柱進(jìn)行陽(yáng)離子純化,之后采用SOURCE 15RPC ST 4.6/150進(jìn)行反相純化。對(duì)收集到的具有抑菌活性的樣品經(jīng)高效液相色譜檢測(cè),判斷其純度達(dá)到質(zhì)譜分析要求,經(jīng)Tricine-SDS-PAGE檢測(cè),初步判定其分子量約為2000 kDa。采用質(zhì)譜MALDI-TOF測(cè)定該細(xì)菌素的分子量為1770 kDa。

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