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牦牛奶酪中乳酸菌的隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性研究
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 181 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 楊吉霞,陳芝蘭,楊海燕,黃艾祥,陳宗道
關(guān)鍵詞: 牦牛奶酪;乳酸菌;隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性;聚類分析;基因型鑒定;遺傳相似系數(shù)
摘要:

目的:探討隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性(RAPD)技術(shù)在牦牛奶酪中乳酸菌基因型研究方面的應(yīng)用價(jià)值。方法:采用M13引物,對(duì)退火溫度、Mg2+濃度、引物用量、Taq酶用量、模板量進(jìn)行單因素梯度試驗(yàn),建立最佳反應(yīng)條件,然后對(duì)分離自牦牛奶酪的39株乳酸菌進(jìn)行擴(kuò)增,用NTsys 2.10e軟件分析擴(kuò)增圖譜,計(jì)算遺傳相似系數(shù),進(jìn)行聚類分析,并與16S rRNA測(cè)序得到的菌種鑒定結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果:39株乳酸菌相互間的遺傳相似系數(shù)在0.47~0.98之間,當(dāng)相似系數(shù)為0.78時(shí),菌株被分成10個(gè)組,除X23、Y36和Y37之外,其余菌株均按照不同的菌種聚類,與16S rRNA測(cè)序結(jié)果基本一致,聚類有較強(qiáng)的地域相關(guān)性。結(jié)論:RAPD技術(shù)可用于牦牛奶酪中乳酸菌的基因型研究,可用于菌種鑒定和遺傳親緣關(guān)系分析。

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