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PCR-DGGE結(jié)合種特異性PCR技術(shù)檢測市售酸奶中乳酸菌
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 172 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 王 營,孟祥晨
關(guān)鍵詞: 變性梯度凝膠電泳;種特異性PCR擴增;乳酸菌;酸奶
摘要:

應(yīng)用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)合變性梯度凝膠電泳技術(shù)(PCR-DGGE),并結(jié)合種特異性PCR技術(shù)檢測酸奶中的乳酸菌組成。優(yōu)化DGGE檢測相關(guān)條件,結(jié)果表明最佳DGGE條件為:凝膠變性梯度范圍30%~60%,電泳時間300min。利用上述條件能有效區(qū)分植物乳桿菌、乳雙歧桿菌,但是無法區(qū)分保加利亞乳桿菌與嗜酸乳桿菌,嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌與干酪乳桿菌;在此結(jié)果基礎(chǔ)上,再采用種特異性PCR技術(shù),能夠有效區(qū)分上述存在共遷移現(xiàn)象的菌株。采用上述技術(shù)檢測6種市售酸奶中乳酸菌,發(fā)現(xiàn)6種產(chǎn)品中均包含保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、植物乳桿菌和嗜酸乳桿菌;3種產(chǎn)品含有干酪乳桿菌;1種產(chǎn)品標(biāo)識有雙歧桿菌,但未檢測到。通過選擇性培養(yǎng)基分離計數(shù)酸奶樣品中乳酸菌,兩種方法所得的檢測結(jié)果相同,驗證檢測上述方法的可靠性。研究表明,PCR-DGGE與種特異性PCR技術(shù)結(jié)合可有效檢測酸奶中乳酸菌組成。

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