領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
利用PCR擴(kuò)增出鼠傷寒沙門氏菌鞭毛蛋白基因fliC，連接到原核表達(dá)載體pET28a(+)上，測序鑒定后轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)pLysS感受態(tài)細(xì)胞中，構(gòu)建了原核表達(dá)系統(tǒng)。經(jīng)1mmol/L異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)及Ni-NTA純化后，得到了帶6×His純化標(biāo)簽的分子質(zhì)量大小約為54.6kD的表達(dá)產(chǎn)物，和預(yù)測蛋白大小一致，且大部分表達(dá)產(chǎn)物以可溶形式存在? 利用Western-blotting進(jìn)一步鑒定，結(jié)果表明，該蛋白能與抗 His 標(biāo)簽的單抗發(fā)生特異性反應(yīng)。用純化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠，獲得多克隆抗體，并對(duì)抗血清的效價(jià)和特異性進(jìn)行檢測，結(jié)果表明，多抗的效價(jià)較高，特異性較好。
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