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藠頭凝集素的分離純化和凝集活性分析
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 120 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 肖秀情,丁學(xué)知,夏立秋,楊 琦,徐 沙
關(guān)鍵詞: 藠頭;凝集素;純化;高效液相色譜;血凝集
摘要:

藠頭鱗莖經(jīng)pH7.3的磷酸緩沖液抽提,80%飽和硫酸銨沉淀粗分離,Q Sepharose強(qiáng)陰離子交換色譜及Superdex 200 HR 10/30葡聚糖凝膠色譜分離得到藠頭凝集素(Allium chinense lectin,ACL)。血細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn)顯示:ACL對(duì)兔血紅細(xì)胞具有高凝集活性,其最小凝集質(zhì)量濃度為0.2μg/mL;在70℃熱處理10min后其凝集活性保持不變,表明該凝集素具有較好的熱穩(wěn)定性。經(jīng)100mmol/L HCl處理后ACL的凝集活性無(wú)顯著變化,而在100mmol/LNaOH處理后,其凝血活性明顯降低,由此表明ACL在極端堿性環(huán)境中較不穩(wěn)定,但是在極端酸性環(huán)境中較穩(wěn)定。甘露糖能抑制ACL對(duì)兔血紅細(xì)胞的凝集作用,揭示了ACL可能與甘露糖存在特異性結(jié)合。

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