領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：利用基因重組技術(shù)，構(gòu)建腺苷酸脫氨酶高效表達(dá)的重組菌株。方法：以前期構(gòu)建的產(chǎn)腺苷酸脫氨酶重組大腸桿菌BL21（DE3）/pET28α-AMPD中來源于鼠灰鏈霉菌（Streptomyces murinus）目的基因?yàn)槟０澹O(shè)計(jì)特異性引物擴(kuò)增腺苷酸脫氨酶基因，亞克隆至游離型表達(dá)載體pHY-WZX，轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌WB600。結(jié)果：成功篩選獲得了一株產(chǎn)腺苷酸脫氨酶重組枯草芽孢桿菌WB600/pHY-AMPD，進(jìn)一步在搖瓶中探究了發(fā)酵培養(yǎng)基成分對(duì)重組酶發(fā)酵的影響。獲得了較優(yōu)發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖10 g/L、 酵母膏30 g/L、CaCl2 0.5 g/L、檸檬酸三鈉1 g/L、NaH2PO4 10 g/L、K2HPO4 10 g/L、(NH4)2SO4 5 g/L，37 ℃、200 r/min發(fā)酵60 h搖瓶發(fā)酵液酶活力可達(dá)到（2 230±50） U/mL。結(jié)論：本研究實(shí)現(xiàn)了鼠灰鏈霉菌來源的腺苷酸脫氨酶基因在枯草芽孢桿菌中表達(dá)。
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