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芫荽酸性磷酸酶的提取、純化及酶學(xué)性質(zhì)研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 167 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 王 丹,萬 驥,傅 婷,唐云明
關(guān)鍵詞: 芫荽;酸性磷酸酶;分離純化;酶學(xué)性質(zhì)
摘要:

采用硫酸銨分級沉淀、CM-Sepharose離子交換層析、Superdex-200凝膠過濾層析法,從新鮮芫荽中分離純化出電泳純的酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)。該酶的酶活回收率為14.20%、純化倍數(shù)為238.60、酶比活力為295.87 U/mg、亞基分子質(zhì)量約為53.8 kD;芫荽ACP酶學(xué)性質(zhì)研究結(jié)果表明:該酶的最適反應(yīng)溫度為55 ℃,在50 ℃以下時較穩(wěn)定,因此該酶對溫度較敏感;該酶的最適反應(yīng)pH值為5.8,在pH?4.0~7.0之間較穩(wěn)定,表明該酶耐受于酸性環(huán)境;芫荽ACP的對硝基苯酚磷酸二鈉Km值為0.63 mmol/L,表明該酶與底物對硝基苯酚磷酸二鈉具有較高的親和力;甲醇、乙醇、異丙醇、抗壞血酸、草酸、Cu2+、Pb2+、Ag+對該酶具有強(qiáng)烈的抑制作用;Mg2+、Mn2+、Ba2+、K+對該酶具有一定的激活作用。

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